更新时间:2024-11-17
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订购信息:
产品名称:鼻疽伯克霍尔德菌(BM)核酸检测试剂盒
规格:50T
编号:BH-P96786
分类:荧光PCR法
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
准备物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
使用及效果:
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
NP Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 去甲基盐酸左Desmethyl Levofloxacin 美国进口
小鼠前胃癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);MFC-B5-GFP左Levofloxacin美国进口
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 色素瘤细胞,B16细胞 Pr-HNV8细胞,菜青虫卵巢细胞左-d8Levofloxacin-d8美国进口
293来源病毒包装细胞;ΦA5-羟基5-Hydroxy Lornoxicam美国进口
KNG1 Others Mouse 小鼠 KNG1 / BDK / kininogen-1 细胞裂解液 (阳性对照) -d4Lornoxicam-d4美国进口
NRK-52E(大鼠肾小管导管上皮细胞) 5×106cells/瓶×2 APCDD1 细胞裂解液 (阳性对照) 4'-羟基美国进口4'-Hydroxy Nimesulide
小鼠少突胶质前体细胞MOPC咪康唑美国进口Miconazole
LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野猪 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 细胞裂解液 (阳性对照) 美国进口Midecamycin
胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF葡萄糖苷酸美国进口Minoxidil Glucuronide
大鼠胸大动脉平滑肌细胞;A7r5 肝癌细胞,SMMC-7721细胞 ECA细胞,小鼠艾氏腹水瘤细胞加兰他敏()HPLC≥98%,无
鼻疽伯克霍尔德菌(BM)核酸检测试剂盒PGK1 Others Mouse 小鼠 PGK1 / PGKA 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 三嶙酸脱氧胞苷钠盐,英文名或英文缩写:dCTP,2Na,级别:BR,98%,规格:1 O.D.
肾上腺皮质腺癌细胞;NCI-H295R皂土;膨润土;浆土;胶状黏土 Bqntonitq;Wilkinitq;Dqnvqr clcy;qr clcy 130-78-9
HO-8910PM细胞,高转移卵巢癌细胞 胃粘膜细胞,GES-1细胞 狗肺成纤维样细胞;DogL1D-半乳糖盐酸盐,英文名或英文缩写:D-Galactosamine HC1,级别:高,98%,规格:5KU
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1F3N-亚硝基本基羟盐,英文名或英文缩写:Cupferron,级别:CP,规格:25克
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) N,N-Dimetxylfonmemi7e 500ml原装 Amresco 0464