更新时间:2024-11-22
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订购信息:
产品名称:玉米内源基因核酸检测试剂盒
规格:48T 0.1PCR管
编号:BH-P97115
分类:PCR-荧光探针法
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
准备物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
使用及效果:
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
CD46 Others Human CD46 细胞裂解液 (阳性对照) 氧化前胡素()OxypeucedaninHPLC≥98%,
MAO EBV-转化细胞野百合碱()Crotaline;MonocrotalineHPLC≥98%,
CM-H018成纤维细胞*培养基100mL野()ScularinHPLC≥98%,
SP2/0, 小鼠骨髓瘤细胞野黄芩素()SculareinHPLC≥98%,
肾癌Wilms细胞;G401 大鼠气管平滑肌细胞*培养基 100mL8-O-乙酰山栀苷甲酯()8-O-Acetyl shanzhiside methyl esterHPLC≥98%,
小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素);AtT-20N,N'-二苄基-4,13-二氮杂-18-冠6-(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)N,N'-Dibenzyl-4,13-diaza-18-crown 6-Ether
ICOS Others Mouse 小鼠 ICOS / AILIM / CD278 细胞裂解液 (阳性对照) 4,13-二氮杂-18-冠-6-(>98.0%(T))>98.0%(T)4,13-Diaza-18-crown 6-Ether
CNE-2 低分化鼻咽癌细胞二苯并-30-冠-10-(>97.0%(GC))>97.0%(GC)Dibenzo-30-crown 10-Ether
BxPC-3原位胰腺腺癌细胞 BxPC-3 in situ pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% FBS4,10-二氮杂-15-冠5-(>96.0%(GC))>96.0%(GC)4,10-Diaza-15-crown 5-Ether
FASLG Protein Human 重组 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 (His 标签)二苯并-15-冠5-(>95.0%(GC))>95.0%(GC)Dibenzo-15-crown 5-Ether
玉米内源基因核酸检测试剂盒SD大鼠骨髓间质干细胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells1,5-二羟基奈100克
SK-N-SH细胞,神经上皮瘤细胞 环状芽孢杆菌 前列腺上皮细胞RNAHPEpiC miRNA5 μg偶氮录膦mA;2-(4-录-2-膦醋基本偶氮)-7-(3-酰基本偶氮)-1,8-二羌基-3,6-二磺醋 Chlorophosphonczo Mc 86167-87-2
SF767(脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 (25%) Glutaraldehyde solution (Grade I, 25% ... 100ML 通用试剂
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鼻咽癌细胞;CNE-2ZdTTP 100ul Pharmacia