更新时间:2024-11-23
GV3101(pSoup) 感受态细胞100ul*10菌株一种常用于质粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的产物可与pUC载体编码的b-半乳糖苷酶氨基端实现a互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1 的突变有利于克隆DNA 的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
GV3101(pSoup) 感受态细胞100ul*10以下是的订购信息储存条件:-70℃冻存
操作方法:
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100 μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,*次使用前做预实验确定所加质粒的量),用手管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3. 加入700 μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
GV3101(pSoup) 感受态细胞100ul*104. 6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天
注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
GV3101(pSoup) 感受态细胞100ul*103. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4. 浓度不应高于25 μg/ml,过高的浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
5. 培养基中加入的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
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小鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒 :英文名称; oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit 购买我公司ELISA试剂盒保证质量,灵敏性高、特异性强、重复性好等优点已经得到广大客户的认可,您可放心,且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。 :规格; 96T/48T 小鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒厂家 小鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒报价
小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒 :英文名称; anti-Monocyte antibody,AMA ELISA Kit 购买我公司ELISA试剂盒保证质量,灵敏性高、特异性强、重复性好等优点已经得到广大客户的认可,您可放心,且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。 :规格; 96T/48T 小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒厂家 小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒报价
小鼠肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒 :英文名称; Kidney injury molecule 1,Kim-1 ELISA Kit 购买我公司ELISA试剂盒保证质量,灵敏性高、特异性强、重复性好等优点已经得到广大客户的认可,您可放心,且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。 :规格; 96T/48T 小鼠肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒厂家 小鼠肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒报价
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小鼠抗(AT)ELISA试剂盒 :英文名称; Anti-trypsin,AT ELISA Kit 购买我公司ELISA试剂盒保证质量,灵敏性高、特异性强、重复性好等优点已经得到广大客户的认可,您可放心,且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。 :规格; 96T/48T 小鼠抗(AT)ELISA试剂盒厂家 小鼠抗(AT)ELISA试剂盒报价
GV3101(pSoup) 感受态细胞100ul*10小鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒 :英文名称; A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit 购买我公司ELISA试剂盒保证质量,灵敏性高、特异性强、重复性好等优点已经得到广大客户的认可,您可放心,且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。 :规格; 96T/48T 小鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒厂家 小鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒报价
小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒 :英文名称; pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit 购买我公司ELISA试剂盒保证质量,灵敏性高、特异性强、重复性好等优点已经得到广大客户的认可,您可放心,且我司有专门的售后部门对您门对您进行全