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EGY48 感受态细胞100ul*50

产品时间:2018-11-17

简要描述:

EGY48 感受态细胞100ul*50菌株一种常用于质粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的产物可与pUC载体编码的b-半乳糖苷酶氨基端实现a互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1 的突变有利于克隆DNA 的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

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EGY48 感受态细胞100ul*50以下是的订购信息储存条件:-70℃冻存
操作方法:
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100 μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,*次使用前做预实验确定所加质粒的量),用手管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3. 加入700 μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
EGY48 感受态细胞100ul*504. 6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天
注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
EGY48 感受态细胞100ul*503. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4. 利福平浓度不应高于25 μg/ml,过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
5. 培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。

 aPT1/aPT2 人抗凝血素抗体 规格: 48T/96T

 ATR 人抗凝血酶受体 规格: 48T/96T

 AT-Ⅲ 人抗凝血酶Ⅲ抗体 规格: 48T/96T

 ASCA 人抗酿酒酵母抗体 规格: 48T/96T

 ASCA 人抗酿酒酵母抗体 规格: 48T/96T

 ABAb 人抗脑组织抗体 规格: 48T/96T

 ABAb 人抗脑组织抗体 规格: 48T/96T

 IFA 人抗内因子抗体 规格: 48T/96T

 AECA 人抗内皮细胞抗体 规格: 48T/96T

 AGA 人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体 规格: 48T/96T

 AGA 人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体 规格: 48T/96T

 AOAb 人抗卵巢抗体 规格: 48T/96T

 EHF 人抗流行性出血热病毒抗体IgM  规格: 48T/96T

 EHF 人抗流行性出血热病毒抗体IgM  规格: 48T/96T

 EHF 人抗流行性出血热病毒抗体IgG  规格: 48T/96T

 APSA 人抗磷脂酰丝氨酸抗体 规格: 48T/96T

 APSA 人抗磷脂酰丝氨酸抗体 规格: 48T/96T

 Apl/APA 人抗磷脂抗体 规格: 48T/96T

 TA 人抗磷壁酸抗体 规格: 48T/96T

 TA 人抗磷壁酸抗体 规格: 48T/96T

 ALG 人抗淋巴细胞球蛋白 规格: 48T/96T

 ALA 人抗淋巴细胞抗体 规格: 48T/96T

 ASO 人抗链球菌溶血素O/抗O 规格: 48T/96T

 ADH/VP/AVP 人抗利尿激素/精氨酸加压素 规格: 48T/96T

 SCA 人抗类固醇细胞抗体 规格: 48T/96T

 RANA 人抗类风湿关节炎核抗原抗体 规格: 48T/96T

 RANA 人抗类风湿关节炎核抗原抗体 规格: 48T/96T

 anti-RV 人抗狂犬病毒抗体 规格: 48T/96T

 anti-RV 人抗狂犬病毒抗体 规格: 48T/96T

 ENA-Ab 人抗可提取核抗原抗体 规格: 48T/96T

 SLA 人抗可溶性肝抗原抗体 规格: 48T/96T

 Attacin 人抗菌肽 规格: 48T/96T

 anti-CMV IgM 人抗巨细胞病毒抗体IgM 规格: 48T/96T

 anti-CMV IgM 人抗巨细胞病毒抗体IgM 规格: 48T/96T

 anti-CMV IgG 人抗巨细胞病毒抗体IgG 规格: 48T/96T

 anti-macrophage Ab 人抗巨噬细胞抗体 规格: 48T/96T

 TRACP-5b 人抗酒石酸酸性磷酸酶5b 规格: 48T/96T

 AsAb 人抗抗体 规格: 48T/96T

 AFA 人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体 规格: 48T/96T

 AKA 人抗角蛋白抗体 规格: 48T/96T

 EGY48 感受态细胞100ul*50CLA 人抗胶原蛋白抗体 规格: 48T/96T

 ATMA/TMAB 人抗甲状腺微粒体抗体 规格: 48T/96T

 ATGA/TGAB 人抗甲状腺球蛋白抗体 规格: 48T/96T

 TPO-Ab 人抗甲状腺过氧化物酶抗体 规格: 48T/96T

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