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Y190 感受态细胞100ul*50

产品时间:2018-11-17

简要描述:

Y190 感受态细胞100ul*50菌株一种常用于质粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的产物可与pUC载体编码的b-半乳糖苷酶氨基端实现a互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1 的突变有利于克隆DNA 的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

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Y190 感受态细胞100ul*50以下是的订购信息储存条件:-70℃冻存
操作方法:
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100 μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,*次使用前做预实验确定所加质粒的量),用手管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3. 加入700 μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
Y190 感受态细胞100ul*504. 6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天
注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
Y190 感受态细胞100ul*503. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4. 利福平浓度不应高于25 μg/ml,过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
5. 培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。

 IMA 人缺血修饰白蛋白 规格: 48T/96T

 ALD 人醛缩酶 规格: 48T/96T

 ALD 人醛固酮 规格: 48T/96T

 i-PTH 人全段甲状旁腺素 规格: 48T/96T

 ASGPR 人去唾液酸糖蛋白受体 规格: 48T/96T

 NA 人去甲肾上腺素 规格: 48T/96T

 FK 人趋化因子 规格: 48T/96T

 SRB/CD36 人清道夫受体B 规格: 48T/96T

 SM 人鞘磷脂 规格: 48T/96T

 Dsg-1 人桥粒芯糖蛋白-1 规格: 48T/96T

 Hyl 人羟赖氨酸 规格: 48T/96T

 OH-PYD 人羟基胶原吡啶交联 规格: 48T/96T

 HRGP 人羟脯氨酸糖蛋白 规格: 48T/96T

 Hyp 人羟脯氨酸 规格: 48T/96T

 Dyn 人强啡肽 规格: 48T/96T

 LMP-1 人潜伏膜蛋白1 规格: 48T/96T

 Pro-ANP 人前心钠肽 规格: 48T/96T

 Pro-ANP 人前心钠肽 规格: 48T/96T

 PSA 人前列腺特异性抗原 规格: 48T/96T

 PAP 人前列腺酸性磷酸酶 规格: 48T/96T

 PGF 人前列腺素F 规格: 48T/96T

 PGE2 人前列腺素E2 规格: 48T/96T

 PGE1 人前列腺素E1 规格: 48T/96T

 PTGDS 人前列腺素D合成酶 规格: 48T/96T

 PGDS 人前列腺素D合成酶 规格: 48T/96T

 PGI 人前列环素 规格: 48T/96T

 PCP 人前胶原C端肽酶 规格: 48T/96T

 PA 人前白蛋白 规格: 48T/96T

 CALLA 人普通急性淋巴细胞白血病抗原 规格: 48T/96T

 GLUT3 人葡萄糖转运蛋白3 规格: 48T/96T

 GLUT1 人葡萄糖转运蛋白1 规格: 48T/96T

 GIP 人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽 规格: 48T/96T

 GOD 人葡萄糖氧化酶 规格: 48T/96T

 GKRP 人葡萄糖激酶调节蛋白 规格: 48T/96T

 GCK 人葡萄糖激酶 规格: 48T/96T

Y190 感受态细胞100ul*50 GPI 人葡萄糖6磷酸异构酶 规格: 48T/96T

 SPA 人葡萄球菌蛋白A 规格: 48T/96T

 Tetanus Ab 人破伤风抗体 规格: 48T/96T

 ODF 人破骨细胞分化因子 规格: 48T/96T

 Prednisolone 人泼尼松龙 规格: 48T/96T

 SMM 人平滑肌肌球蛋白 规格: 48T/96T

 Syk 人脾脏酪氨酸激酶 规格: 48T/96T

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