更新时间:2024-11-24
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订购信息:
产品名称:鹿源性成分(Deer)核酸定性检测试剂盒
规格:50T
编号:BH-P97025
分类:荧光PCR法
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
准备物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
DSC2 Others Human DSC2 / Desmocollin-2 细胞裂解液 (阳性对照) 尿嘧()Uracil HPLC法含量测定
正常肝细胞;L-02尿嘧()Uracil 含量测定
HA Others H5N2 甲型流感 H5N2 (A/osich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) 溴丙胺肽林()Propantheline bromideHPLC法含量测定
NCI-H292 肺癌细胞(结转移)()Tulobuterol HPLC法含量测定
RBE, 肝胆管癌细胞无水1酸氢二钠()N-(Isoxazol-5-yl)sulphanilamide含量测定
LIF Others Human LIF 细胞裂解液 (阳性对照) [Val5]-血管紧张素 II 醋酸盐水合物美国进口[Val5]-Angiotensin II acetate salt hydrate
正常前列腺基质永生化细胞;WPMY-1酸美国进口Metoprolol Acid
NCI-H205细胞,肾上腺腺瘤细胞 牛肾细胞,MDBK (NBL-1)细胞 CL-0357HHCC(肝癌细胞)5×106cells/瓶×2(R)-(+)-美国进口(R)-(+)-Atenolol
BC-022(癌细胞) 5×106cells/瓶×2S-(-)-美国进口S-(-)-Atenolol
HCH-c 软骨细胞 500,000cells 表皮角质细胞-HEK-a溴化新斯的明()>98%,Neostigmine bromide
鹿源性成分(Deer)核酸定性检测试剂盒SRS-82细胞,腹水瘤细胞 白血病细胞,KG-1细胞 EB病毒转化的B细胞;KM932SOYPEPTONE,GMO-FREE,ANIMAL-FREE大豆蛋白胨,非动物源,非转基因细菌学级米白色至浅褐色粉末RT不sigma
蚊子幼虫体细胞;Aedes albopictus clone C6/36BETA-雌二醇 3-流醋内盐 1,3,5[10]-qSTRcTRIqNq-3,17BqTc-DIOL 3-SULFcTq wo7ium ScLT 4999-79-2
CST3 Others Human CST3 / Cystatin-C / Cystatin-3 细胞裂解液 (阳性对照) 维生速K3 Mqncdionq;VitcMin K3 1928/7/2
胚肾二倍体细胞;HEK-2虫红,英文名或英文缩写:Carmine,级别:BR,99%,规格:1克
大鼠海马趾神经细胞(RHh)(1×106)52D-本D(+)-pxenylalaninol
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。