核酸检测试剂盒（恒温荧光法）

产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

订购信息：
 产品名称：核酸检测试剂盒（恒温荧光法）
规格：48T
编号：BH-P97194
分类：恒温荧光法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
615小鼠肺癌瘤株;HP615骨抑制素，Osteostatin (human)>95%,BR

TNFRSF10B Others Human  TNFRSF10B / AILR2 / CD262 细胞裂解液 (阳性对照) 骨抑制素（1-5）酰胺，，牛，狗，大鼠，小鼠，兔，马Osteostatin (1-5) amide(human, bovine, dog, horse,mouse, rabbit, rat)>95%,BR

胚胎，皮肤，肌肉;M-20骨抑制素酰胺，Osteostatin amide (human)>95%,BR

CNPY4 Others Human  CNPY4 细胞裂解液 (阳性对照) p60 v-结构域（137-157）p60 v-src (137-157)>95%,BR

SD大鼠骨髓间质干细胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cellsp60 C-结构域底物ⅠLys()p60c-src Substrate ILys(Biotin)>95%,BR
CL-0206SGC7901(胃癌细胞)5×106cells/瓶×2草酸铵(98~101%,BR)Ammonium oxalate hydrate98~101%,BR

MLF, 小鼠成纤维细胞5'-单1酸腺苷(>95%，BR)Adenosine-5'-monophosphate, free acid>95%，BR

Sars结构蛋白表达株;293sars181A 膀胱上皮细胞*培养基 100mL铝十六水(>98%,BR)Aluminum sulfate, hexadecahydrate>98%,BR

急性早幼粒白血病细胞;HL-60葡萄糖-6-1酸脱氢酶，铵悬浮液Glucose-6-phosphate dehydrogenase酶活>200 NADP units/mg，BC

PPP3R1 Others Human  PPP3R1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 苹果酸脱氢酶(>12,000U/ml，BC)Malate dehydrogenase>12,000U/ml，BC
核酸检测试剂盒（恒温荧光法）EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 细胞裂解液 (阳性对照) SaikosaponinC柴胡皂甙C10克BR，粘度500 mpe.s

胎盘绒膜癌细胞;BeWoL-薄荷醇 L-Menthol,≥99% 2216-51-5 25G 通用试剂

HCC-9724细胞，肝癌细胞 小鼠肥大细胞癌细胞,P815细胞 牛肾细胞;MDBKL-谷安醋-γ-苄酯 (+4`C) gcmmc-Bqnzyl L-glutcmctq 1676-73-9

MDCK(犬肾细胞) 5×106cells/瓶×2硅酸钙5克

Promocell C-23010 Fibroblast Growth Medium , 成纤维细胞生长培养基(即用型) 500ml933-88-02-甲基本甲酰录o-Toluoyl chloride