更新时间:2024-11-25
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订购信息:
产品名称:小反刍兽疫病毒(PPRV)核酸定性检测试剂盒
规格:50T
编号:BH-P97006
分类:荧光PCR法
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
准备物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
使用及效果:
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
EED Others Human EED / Embryonic Ectoderm Developme 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 甲基橙(生物染色)Methyl orangeBS
杂交瘤(B类);C3110D2B2分散橙13Disperse Orange 1390%,进口分包
BT549细胞,管癌细胞 喉癌细胞,M4e细胞 大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1)酸性橙74Acid Orange 74>85%
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A4煌橙,藏花橙GCrocein Orange GBS
NCR3 Others Human NKp30 细胞裂解液 (阳性对照) 靛红(吲哚醌)IsatinAR
CM-R065大鼠肾上皮细胞*培养基100mL盐酸三氟拉嗪()HPLC>98%,Trifluoperazine di
CD302 Others Rat 大鼠 CD302 / CLEC13A 细胞裂解液 (阳性对照) 皮质甾酮/肾上腺酮>97.0%Corticosterone
大鼠小胶质细胞RM,前列腺素E1>95%,BR,USP30Alprostadil,PGE1,
JEG-3细胞,绒癌细胞 小鼠树突状细胞肉瘤细胞,DCS细胞 冠状动脉内皮细胞HCAEC四1雌酮,1丙孕素> 99%Altrenogest
HuT 78(T细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2四1雌酮,1丙孕素()HPLC>98%,Altrenogest
小反刍兽疫病毒(PPRV)核酸定性检测试剂盒APLP1 Others Human APLP1 / Amyloid-like protein 1 细胞裂解液 (阳性对照) 达拉菲尼,达帕菲尼>98%,BRAFV600特异性抑制剂Dabrafenib,GSK2118436A
Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256乙酰柠檬酸三丁酯>97%Acetyl tributyl
PG-BE1细胞,肺巨细胞癌(PG)的高转移亚系 叙利亚仓鼠肾细胞,BHK-21细胞 CL-0034BHK-21(仓鼠肾细胞)5×106cells/瓶×2乙酰柠檬酸三乙酯>99%Triethyl acetyl
STO(小鼠胚成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2海藻酸CPAlginic acid
HDLEC-c 类皮肤管内皮细胞(HDLEC)来自少年者 500,000cells 骨细胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)橙皮素>97%,BRHesperitin