登革热病毒3型（DFV-III）核酸检测试剂盒

订购信息：
 产品名称：登革热病毒3型(DFV-III)核酸检测试剂盒
规格：50T
编号：BH-P96923
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
HEC-1-A(内膜腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2 猕猴皮肤细胞;MMS71酸二氢钾（）Potassium Dihydrogen Phosphate比色法含量测定

髓母细胞瘤细胞;D341Med长春胺（）Vincamine含量测定

EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 细胞裂解液 (阳性对照) （）Imidapril HPLC法含量测定

MGC-803 胃癌细胞1酸（）Piperaquine phosphate含量测定

NCI-H1395肺腺癌细胞 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1395 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS（）Cisapride Monohydrate含量测定
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) N-甲酰-DL-0.98Nalpha-Formyl-DL-tryptophan

CL-0396NCI-H226(肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2L-叔丁酯>98%,BRL-Tyrosine tert-butyl ester

CFR Others Human  CFR / CFR-alpha 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) O-苄基-L-0.98O-Benzyl-L-tyrosine

脉络丛上皮细胞RNAHCPEpiC miRNA5 μgN-乙酰-L-赖氨酸/N6-三氟乙酰基-L-赖氨酸>98%,BRN-6-Trifluoroacetyl-L-lysine

6T-CEM细胞，T细胞白血病 巨细胞性肺癌细胞,801-D细胞 细胞O-苄基-L->98%,BRO-Benzyl-L-serine
登革热病毒3型(DFV-III)核酸检测试剂盒心脏微血管内皮细胞裂解物HCMECL3-溴-1,10-邻二氮杂菲(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)3-Bromo-1,10-phenanthroline

TIMD4 Others Human  TIMD4 / TIM4 细胞裂解液 (阳性对照) 5-氯-1,10-菲咯啉(>98.0%(T))>98.0%(T)5-Chloro-1,10-phenanthroline

BHK 叙利亚仓鼠肾细胞2-氯-1,10-邻二氮杂菲(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)2-Chloro-1,10-phenanthroline

CL-0158MGC80-3(胃癌细胞)5×106cells/瓶×24,7-二甲基-1,10-邻二氮杂菲(>98.0%(T))>98.0%(T)4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline

mCF, 小鼠心脏成纤维细胞3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 常春藤配基- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷HPLC≥98%，V
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。