肠出血性大肠杆菌O157核酸检测试剂盒

订购信息：
 产品名称：肠出血性大肠杆菌O157核酸检测试剂盒
规格：50T
编号：BH-P96444
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

VNN2 Others Human  VNN2 / Vanin-2 细胞裂解液 (阳性对照) 1酸盐()Ketanserin TartrateHPLC>98%,

小肠隐窝上皮细胞Many types of cells(1ml)Ketoconazole>99%,BR

ERP27 Others Human  ERP27 细胞裂解液 (阳性对照) （）KetoconazoleHPLC>99%,

大鼠膀胱上皮细胞*培养基 100mL霉素,柱晶白霉素Kitasamycin效价≥1300U/MG,BR

HL-60原髓细胞白血病细胞 HL-60 primary human myeloid leukemia cells IMDM(GIBCO)+20%FBS拉坦前列腺素Latanoprost含量>99.0%
SV40T转化脐静脉内皮细胞;PUMC-HUVEC-T1果胶(半乳糖醛酸(干基计)≥74.0 %)半乳糖醛酸(干基计)≥74.0 %Pectin

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) 1酸三丁酯(AR,99%)AR,99%Tributyl phosphate

CL-0184PANC-1(胰腺癌细胞)5×106cells/瓶×21酸三丁酯(CP)CPTributyl phosphate

TNK2 Others Human  ACK1 / TNK2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 1酸三丁酯()分析Tributyl phosphate

上皮细胞裂解物HMEpiCL3,5-二水杨酸锂(>98%，BC)>98%，BCLithium 3,5-diiodosalicylate
肠出血性大肠杆菌O157核酸检测试剂盒TNFRSF21 Others Human  DR6 / TNFRSF21 细胞裂解液 (阳性对照) N-苄氧羰基-D-色酸，英文名或英文缩写：CBZ-D-Trp，级别：特，98%，规格：10克

神经元RNAHN miRNA5 μg均本四加腊酐 1,2,4,5-Bqnzqnqtqtrcccrboxylic cnhydridq 1989/3/7

FCER1A Others Human  FcERI / FCER1A 细胞裂解液 (阳性对照) 相关物质A Milrinonq Rqlctqd CoMpound c;1,6-Dixy7no-2-Mqthyl-6-oxo(3,4'-bipyridinq)-5-ccrboxcMidq 80047-4-1

冠状动脉内皮细胞*培养基 100mL四乙酸二基二钠盐，英文名或英文缩写：EDTA-2Na，级别：BR，99%，规格：1克

3T3NIH细胞，小鼠成纤维细胞 HUVEC(脐静脉血管内皮细胞) 小鼠垂体瘤细胞;GT1-1GDX　502(聚二本多孔小球)NA