柯萨奇病毒B6核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

订购信息：
 产品名称：柯萨奇病毒B6核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
规格：50T
编号：BH-P97243
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

皮肤色素瘤细胞;SK-MEL-1环胞甙盐酸盐；盐酸环胞苷；安西他滨盐酸盐Cyclocytidine>98%,BR

PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 细胞裂解液 (阳性对照) 5'-三1酸胞苷三钠盐Cytidine-5'-triphosphate (CTP), 3>98%,分子生物学级

Eca-109 食管癌细胞细胞弛素A(>98%，BR)Cytochalasin A>98%，BR

HOS骨肉瘤细胞 Human osteosarcoma cell line HOS EMEM+10% FBS细胞弛素C(>98%，BR)Cytochalasin C>98%，BR

CD70 Protein Rat 重组大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (His 标签)细胞弛素 D(>98%，BR)Cytochalasin D>98%，BR
CL-0436SF17(脑瘤细胞)5×106cells/瓶×2盐酸决奈达隆>99%,盐酸盐Dronedarone HCL

CCNA1 Others Human  CCNA1 / Cyclin-A1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 决奈达隆()HPLC>98%,Dronedarone

肺动脉内皮细胞RNAHPAEC miRNA5 μg雷诺嗪>99%,BRRanolazine HCl

H08910细胞，卵巢癌细胞 肺癌细胞,H125细胞 MLF, 小鼠成纤维细胞阿扎那韦硫酸盐>99%,BRAtazanavir sulfate

豚鼠皮肤细胞;GP-S1阿扎那韦硫酸盐()HPLC>98%,Atazanavir sulfate
柯萨奇病毒B6核酸检测试剂盒（荧光PCR法）TGFBR2 Others Rat 大鼠 TGFBR2 细胞裂解液 (阳性对照) 5-羟基-2-金刚烷酮>98.5%5-hydroxy-2-adamantanone

肾系膜细胞*培养基 100mL右*>99%Es

BALB/3T3 clone A31细胞，小鼠胚胎成纤维细胞 L1210(白血病细胞) EB病毒转化的B细胞;KMY0901右*()>99%,Es

CCL17 Protein Human 重组 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 标签)醋酸*>97%,BRTriamcinolone Acetonide Acetate

SiHa(颈鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 细胞裂解液 (阳性对照) 4-正辛氧基苯(>98.0%(GC))>98.0%(GC)4-n-Octyloxybenzaldehyde