NCI-H2126 人肺癌细胞

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

1、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 培养

液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃，5%CO2细胞

培养箱中培养；

2、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终

止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序

降温盒可直接放入-80℃。

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

MARCO： 巨噬细胞清道夫受体抗体 人小脑颗粒细胞总RNAHCGC NA

EJ人膀胱癌细胞 Human bladder cancer cell line EJ 1640+10% FBS 大鼠细胞周期2(Cyclin-D2)ELISA 试剂盒 TPO-Ab  大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体 IFNGR1 Others Human 人 IFN-gamma R1 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0386MPC-11(小鼠浆细胞瘤)5×106cells/瓶×2 大鼠细胞周期2(CCND2)ELISA试剂盒 IL-28(human Interleukin 28)  人白介素28 96T

MBD1： 甲基化CpG结合蛋白抗体 杂交瘤(B类);IB3C10H12A12G2H8F3

NCI-H23(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(单核细胞白血病) 大鼠细胞周期1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒 IL-29(human Interleukin 29)  人白介素29 96T

HEXDC： 基己糖苷酶D抗体 水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S1 卵巢癌细胞，H08910细胞 K-562(慢性髓原白血病细胞)

CD79B Others Rat 大鼠 CD79B / B29 人细胞裂解液 (阳性对照) 人蛋白酶3特异性抗中性粒细胞胞质抗体(PR3-ANCA)ELISA 试剂盒 HBA1(hemoglobin alpha 1) 人类血红蛋白α1抗原 0.5mg

HHLA2： HHLA2蛋白抗体 CM-M058小鼠膀胱上皮细胞培养基100mL

Tca8113-P60细胞，人舌癌细胞系 铜绿假单胞菌 大鼠肝细胞;BRL 3A 人蛋白酶3抗体(PR3Ab)ELISA 试剂盒 VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-containing) 乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原 0.5mg

Hyp： 羟脯酸抗体 EFNB2 Others Human 人 EFNB2 / EphrinB2 人细胞裂解液 (阳性对照)

NCI-H2126 人肺癌细胞PTH1R Others Human 人 PTH1R / PTHR1 / PTH1 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠凋亡相关因子配体(FASL)ELISA试剂盒 BMP-4  大鼠骨成型蛋白4 96T

Plexin B2： 神经丛蛋白B2抗体 罗猴胎肾细胞;MA104

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌细胞 大鼠凋亡相关因子配体(FASL) ELISA 试剂盒 BMP-2  大鼠骨成型蛋白2 96T

Phospho-p53BP1 (Ser1778)： 0酸化p53结合蛋白1抗体 IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / DER4 人细胞裂解液 (阳性对照)

双位点HC-kit受体细胞株;DMF7 大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒 u-T3(Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine)  人高敏状腺原酸 96T