LN229+LUC人胶质瘤细胞荧光素酶标记

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

1、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 培养

液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃，5%CO2细胞

培养箱中培养；

2、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终

止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序

降温盒可直接放入-80℃。

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的产品：

IFNL1 Protein Human 重组人 IL-29 / Ierleukin-29 蛋白 (His 标签) 大鼠血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)ELISA试剂盒 Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH  小鼠D-乳酸脱氢酶 96T

non-muscle Myosin IIA： 非平滑肌肌球蛋白2A抗体 PTPRA Others Human 人 PTPRA / PTPalpha (aa 174-793) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

大鼠脑微血管内皮细胞培养基 100mL 大鼠血管内皮生长因子D(VEGFD)ELISA试剂盒 AmAC-1(Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1)  人巨噬细胞替代激活相关化学因子1 96T

MMS19： DNA修复甲基磺酸敏感性基因19抗体 COLO-320细胞，结肠腺癌细胞 直肠腺癌,HR-8348细胞 人巨细胞白血病细胞株;Mo7e

KLK11 Others Mouse 小鼠 KLK11 / Kallikrein-11 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠血管内皮生长因子C(VEGFC)ELISA试剂盒 IL-21  大鼠白介素21 96T

非洲绿猴肾细胞;BS-C-1 人钩端螺旋体IgM(Lebtospira)ELISA 试剂盒 Cyclin D2 周期2抗原 0.5mg

H3N1 hemagglutinin： 流感病毒H3N1血凝素抗体 人胚肾细胞(SV40T基因修饰);293T/17

L6(大鼠成肌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 AXR2 / CMG2 人细胞裂解液 (阳性对照) 人钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA 试剂盒 Cyclin D3(C-term) 周期3抗原 0.5mg

Hoxb3： 同源盒蛋白HoxB3抗体 人外根壳细胞裂解物HHORSCL

ANGPT4 Protein Human 重组人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 标签) 人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)ELISA 试剂盒 CYP3A4(Cytochrome p450 3A4) 细胞色素P450 3A4抗原 0.5mg

LN229+LUC人胶质瘤细胞荧光素酶标记phospho-PKMYT1(Thr495)： 0酸化髓鞘转录因子1激酶抗体 PT67细胞，小鼠逆转录病毒包装细胞 人癌细胞,MCF-7/ER36细胞 小鼠皮质神经元MN-c

HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠肝X受体α(LXRα)ELISA试剂盒 EBv IgM(Human epstein-barr virus IgM)  人EB病毒IgM 96T

Phospho-PDGFRA(Tyr988)： 0酸化血小板源性生长因子受体α 0.1ml

Rhesus antibody Rh KCNE1L 离子通道蛋白家族成员1样蛋白抗体 CM-H125人脑成纤维细胞培养基100mL

A549人非小细胞肺癌细胞 A549 cells in human non small cell lung cancer F-12K+10% FBS 大鼠甘油三酯(TG)ELISA试剂盒 Resistin  大鼠抵抗素 96T

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。