K562人慢性骨髓性白血病细胞系

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

    a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。        

     c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

     b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。  

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

l-Myc： Myc基因肺癌相关蛋白抗体 SK-BR-3细胞，腺癌细胞 人食管癌细胞,TE-1细胞 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1

VNN1 Others Mouse 小鼠 VNN1 / Vanin-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠无翅型MMTV整合位点家族成员3A(W3A)ELISA试剂盒 HSF1(Mouse Heat Shock Factor 1)  小鼠热休克因子1 96T

Megalin： 糖蛋白gp330抗体 人口腔角质细胞cDNAHOK cDNA

PC9人肺癌细胞 PC9 human lung cancer cells DMEM+10% FBS 大鼠无翅型MMTV整合位点家族成员3(W3)ELISA试剂盒 VEGFR-3/Flt-4(Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2)  人血管内皮细胞生长因子受体3 96T

phospho-MyoD1(Ser200)： 0酸化肌原调节蛋白抗体 CPE Others Human 人 CPE 人细胞裂解液 (阳性对照)

Neuro-2a/N2a(小鼠脑神经瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 人促红细胞生成素抗体(EPO-Ab)ELISA试剂盒 IL-16(Interleukin-16) 白介素16抗原 0.5mg

HPV16 E7： 人瘤病毒16型E7抗体 小鼠小胶质细胞MM

CXCL11 Protein Human 重组人 I-TAC / CXCL11 蛋白 人雌酮E(ESONE)ELISA 试剂盒 IL-16/LCF(interleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白细胞介素-16抗原 0.5mg

HPV58 E6： 人类状瘤病毒58 E6蛋白抗体 CHST11 Others Human 人 CHST11 / C4ST-1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人淋巴内皮细胞培养基 100mL 人雌三醇(E3)ELISA 试剂盒 IL-18/IGIF(Interleukin-18) 白细胞介素-18/干扰素γ诱导因子 0.5mg

K562人慢性骨髓性白血病细胞系RNF131： 环指蛋白131抗体 TGFB1 Others Rat 大鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 人细胞裂解液 (阳性对照)

NCI-H661 人大细胞肺癌细胞 大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA 试剂盒 Human Cortisol  人唾液96T

Phospholipase A2 activator protein： 0脂酶A2激活蛋白抗体 CHOdhfr细胞，二氢缺陷型中国仓鼠卵巢细胞 人癌细胞系,1590细胞 人星形胶质细胞裂解物HAL

ACE2 Others Rat 大鼠 ACE2 / ACEH 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA 试剂盒 E2(Human Estradiol)  人雌二醇 96T

thymidine phosphorylase： 胸苷0酸化酶抗体 猪肾细胞;PK(15)