HEK-293（293）人胚肾细胞

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

    a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。        

     c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

     b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。  

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

MEI-1： 减数分裂缺陷蛋白1抗体 A172细胞，胶质母细胞瘤细胞 肝细胞癌,HepG2细胞 人结直肠腺癌细胞;COLO 205

CLEC3B Others Mouse 小鼠 CLEC3B / Teanectin 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA 试剂盒 TSLP(Human thymic stromal lymphopoietin)  人胸腺基质淋巴细胞生成素 96T

MTCH1： 细胞增殖诱导蛋白60(早老素相关蛋白) 0.2ml

Rhesus antibody Rh Ephrin A3/EFNA3 酪蛋白激酶A3受体抗体 人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg

Super Tube狗肾细胞 Super Tube canine kidney cells D-MEM/F-12培养基(GIBCO)+10%FBS 大鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒 TARC/CCL17  大鼠胸腺活化调节趋化因子 96T

HERC2： HERC2 E3泛素蛋白连接酶抗体 人表皮黑色素细胞-浅色素裂解物HELM-l L

ANGPT2 Protein Human 重组人 ANG2 / Angiopoietin-2 蛋白 (His 标签) 人高速泳动蛋白17(HMG-17)ELISA 试剂盒 DRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受体-D5抗原 0.5mg

HERC3： HERC3 E3泛素蛋白连接酶抗体 KIR2DL4 Others Human 人 KIR2DL4 / CD158D CHO细胞裂解液 (阳性对照)

人小气道上皮细胞培养基 100mL 人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1) ELISA试剂盒 DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羟化酶(抗原) 0.5mg

HERC4： HERC4 E3泛素蛋白连接酶抗体 新生牛眼晶体上皮细胞;NBLE 人甲状腺癌细胞，SW579细胞 RIN-m5F细胞，小鼠β胰岛素瘤细胞

HEK-293（293）人胚肾细胞Perilipin A： 脂滴包被蛋白Perilipin-A抗体 hFOB 1.19细胞，人SV40转染成骨细胞 人癌细胞(耐),MCF-7/ADR细胞 小鼠小脑星形胶质细胞MA-c

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠甘露糖结合凝集素(MBL)ELISA试剂盒 Human Leishimaria antibody  人利什曼原虫抗体 CM-H117人脑静脉血管内皮细胞培养基100mL

NCI-H358人非小细胞肺癌细胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)ELISA试剂盒 ACTH  大鼠促肾上腺皮质激素 96T

PAS1C1： 核纤层蛋白A相关结构蛋白1抗体 LY86 Others Mouse 小鼠 LY86 / MD1 人细胞裂解液 (阳性对照)

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;MuM-2B 大鼠甘露糖结合蛋白(MBL)ELISA试剂盒 FSH  大鼠促卵泡素 96T