DMS 114人小细胞肺癌细胞

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

1、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 培养

液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃，5%CO2细胞

培养箱中培养；

2、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终

止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序

降温盒可直接放入-80℃。

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

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Mitochondrial Pyruvate dehydrogenase kinase 1： 酸脱氢酶激酶1抗体 CM-R118大鼠虹膜色素上皮细胞培养基100mL

IGFBP7 Protein Human 重组人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 标签) 大鼠游离原卟啉(FEP)ELISA试剂盒 STK(Reat serine/threonine protein kinase,STK)  大鼠丝酸/苏酸蛋酸酶 96T

MAPK11： 原活化的蛋白激酶p38β抗体 XCL2 Others Human 人 XCL2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

大鼠肾小球内皮细胞培养基 100mL 大鼠游离状腺原酸(fT3)ELISA试剂盒 LH  鱼促黄体激素 96T

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;MuM-2B 人抗核因子抗体(ANF)ELISA 试剂盒 NKR ; Neurokin B receptor (Neuromedin K receptor; NK-4 receptor) 神经激肽-B受体(抗原) 0.5mg

HOXA13： 同源异型盒基因HOXA13抗体 人胚肾上皮细胞系;KiMA

HCC1937(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌细胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴肾细胞;LLC-MK2 人抗核小体抗体IgG(AnuA-IgG)ELISA 试剂盒 ATF3 (Activating Transcription Factor3) 活化转录因子3抗原 0.5mg

Phospho-HDAC4 (Ser246)： 0酸化组蛋白去乙酰化酶4(Ser246)抗体 人骨骼肌细胞RNAHSkMC miRNA5 μg

SF126(人脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)ELISA 试剂盒 ATM(ataxia telangiectasia mutated) 毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗原 0.5mg

DMS 114人小细胞肺癌细胞非洲绿猴肾细胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1 大鼠肌肉0酸果糖激酶(PFKM)ELISA试剂盒 AFA(Human anti-filaggrin antibody)  人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体 兔角膜前基质层成纤维细胞;RCFBF

大鼠雪旺细胞(RSC)(5×105) 786-O [786-0], 人肾透明腺癌细胞 Human 大鼠肌球蛋白重链8(MYH8)ELISA试剂盒 TF  大鼠组织因子 96T

PTGFR： 前列腺素F2a受体抗体 人肾系膜细胞裂解物HRMCL

PGF Protein Mouse 重组小鼠 PIGF / PLGF 蛋白 大鼠肌球蛋白重链7(MYH7)ELISA试剂盒 CCP(Human anti-cyclic citrullinated peptide)  人抗环胍酸肽抗体 GPT2 Others Rat 大鼠 GPT2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

HL-60 人原髓细胞白血病细胞 大鼠肌球蛋白重链6(MYH6)ELISA试剂盒 IL-27(Mouse Interleukin 27) 小鼠白介素27 96T