DMS 53人肺癌细胞

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

1、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 培养

液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃，5%CO2细胞

培养箱中培养；

2、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终

止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序

降温盒可直接放入-80℃。

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的产品：

Mast Cell Chymase： 肥大细胞类1抗体 Hela, 人细胞系 小鼠成纤维细胞,3T3TK细胞 SPA-A1(肺腺癌细胞)

SIGLEC5 Others Human 人 SIGLEC5 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠诱导型合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 PGE2 (Rabbit Prostaglandin E2)  兔子前列腺素E2 96T

Metronidazole(1C2)：单克隆抗体 小鼠子细胞;U14

RH-35大鼠肝癌细胞 RH-35 rat hepatoma cells DMEM培养基+10%FBS 大鼠诱导型合成酶(iNOS)ELISA 试剂盒 FSH  鱼促卵泡素 96T

MrpL12： 线粒体核糖体蛋白L12抗体 FGFR2 Others Human 人 FGFR2 / CD332 人细胞裂解液 (阳性对照)

HBZY-1(大鼠肾小球系膜细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2 SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1 人抗环胍酸肽抗体(CCP)ELISA 试剂盒 ATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化复制因子1 0.5mg

Hexokinase 1： 己糖激酶1抗体 人膀胱平滑肌细胞RNAHBdSMC miRNA5 μg

SC-1(小鼠胚胎细胞) 5×106cells/瓶×2 人抗呼吸道合胞病毒抗体(RSV)ELISA 试剂盒 NPS/Neuropeptide S 神经肽S 0.5ml

Hexokinase 2： 己糖激酶2抗体 HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)

胎儿骨髓间质干细胞 Fetal bone marrow mesenchymal stem cells 人抗呼吸道合胞病毒抗体(RSV IgM)ELISA试剂盒 NKB (Neurokinins B) 神经激肽B(抗原) 0.5mg

DMS 53人肺癌细胞PTK6： 酪酸蛋白激酶6/激酶抗体 TIMP1 Others Human 人 TIMP-1 / TIMP1 人细胞裂解液 (阳性对照)

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B 大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA 试剂盒 TAb(Mouse Thyroxine antibody) 小鼠甲状腺素抗体 兔角膜后基质层成纤维细胞;RCBBF

大鼠少突胶质前体细胞(ROPC)(5×105) SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌细胞系 Human 大鼠肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)ELISA试剂盒 Cry Beta(Human crystal proteins Beta)  人晶体蛋白β 96T

PCDHAC2： 原钙粘蛋白介导的PCDHαC2受体抗体 人滑膜细胞裂解物HSL

VEGFA Protein Human 重组人 VEGF121b / VEGF-A 蛋白 大鼠肌酸激酶MB同工酶(CKMB)ELISA试剂盒 CLA(Human Collagen autoantibody)  人抗胶原蛋白抗体 F10 Others Human 人 Coagulation Factor X / FX / F10 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。