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DH5α 感受态细胞100ul*20

更新时间:2023-10-26

简要描述:

DH5α 感受态细胞100ul*20是采用大肠杆菌经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA 的化学转化。使用pUC19 质粒检测,转化效率可达108个转化子/μg质粒DNA,-70℃保存3个月转化效率可保持在90%以上。

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 DH5α 感受态细胞100ul*20操作方法(以下操作均按无菌条件的标准进行)
1 取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中,置于冰浴中。
●  一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA 体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
以下实验以100 μl感受态细胞为例。
2 向感受态细胞悬液中加入目的DNA(100 μl 的感受态细胞能够被1 ng 超螺旋质粒DNA 所饱和),轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30 分钟。
3 将离心管置于42℃水浴中放置60-90 秒,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2-3 分钟,该过程不要摇动离心管。
4 向每个离心管中加入900 μl 无菌的SOC 或LB 培养基(不含抗生素), 混匀后置于37℃摇床振荡培养1 小时(160-220 转/分钟),目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
5 将离心管内容物混匀,吸取100 μl 已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB 或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收,倒置平板,37℃培养12-16 小时。
●  涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA 总量较多,可取更少量转化产物涂布平板;反之,如转化的DNA 总量较少,可取200-300 μl 转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少,可通过离心(4,000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)
 DH5α 感受态细胞100ul*20注意事项
1. 感受态细胞应保存在 -70℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免降低感受态细胞的转化效率。
2. 进行转化操作时,应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3 为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到低。
以下是  DH5α 感受态细胞100ul*20的相关产品:

hospho-Ack1  磷酸化Ack1抗体
phospho-AMPK alpha-1 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
phospho-AMPK beta 1  磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体
phospho-ALK  磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体
phospho-ATM 磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
phospho-ATP citrate lyase  磷酸化三磷酸腺柠檬酸裂解酶抗体
phospho-ATR  磷酸化ATR抗体
AMN1 细胞核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体
ALG11 天连接糖基化11抗体
ASF1A 细胞衰老相关蛋白ASF1A抗体
AGPHD1 氨基糖苷类磷酸结构域蛋白抗体
ASGPR1 唾液酸糖蛋白受体1抗体
ARSF 芳香基硫酸酯酶F抗体
AKAP5 A激酶锚定蛋白5抗体
ATXN3L 小脑脊髓共济失调蛋白3抗体
ASTE1 ASTE1蛋白抗体
phospho-APG4B 磷酸化自噬相关蛋白4B抗体
AFAP 微丝相关蛋白1抗体
ADORA1 腺苷A1A受体抗体
ARSB 芳基硫酸酯酶B抗体
ABAT γ氨基丁酸转氨酶抗体

细胞衰老相关蛋白ASF1A抗体 ATF-1 ELISA Kit 转录因子抗体-1(ATF-1)ELISA试剂盒
氨基糖苷类磷酸结构域蛋白抗体 SOX5 ELISA Kit 转录因子SOX-5(SOX5)ELISA试剂盒
唾液酸糖蛋白受体1抗体 SOX4 ELISA Kit 转录因子SOX-4(SOX4)ELISA试剂盒
芳香基硫酸酯酶F抗体 AP-1 ELISA Kit 转录因子1(AP-1)ELISA试剂盒
A激酶锚定蛋白5抗体 TTR ELISA Kit 转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA试剂盒
小脑脊髓共济失调蛋白3抗体 TGFBI/BIGH3 ELISA Kit 转化生长因子-β诱导蛋白IG-H3(TGFBI/BIGH3)ELISA试剂盒
ASTE1蛋白抗体 TGFBR3 ELISA Kit 转化生长因子β受体3(TGFBR3)ELISA试剂盒
磷酸化自噬相关蛋白4B抗体 TGF-βR2 ELISA Kit 转化生长因子β受体2(TGF-βR2)ELISA试剂盒
微丝相关蛋白1抗体 TGFβR2 ELISA Kit 转化生长因子β受体2(TGFβR2)ELISA试剂盒
腺苷A1A受体抗体 TGFBR1 ELISA Kit 转化生长因子β受体1(TGFBR1)ELISA试剂盒
芳基硫酸酯酶B抗体 TGF-β3 ELISA Kit 转化生长因子β3(TGF-β3)ELISA试剂盒
γ氨基丁酸转氨酶抗体 TGFβ2 ELISA Kit 转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒
共济失调蛋白2结合蛋白1抗体 TGF-β1 ELISA Kit 转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒
肿瘤坏死因子α转换酶 TGF-α ELISA Kit 转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒
 DH5α 感受态细胞100ul*20芳香烃受体核转录蛋白2抗体 TGM2 ELISA Kit 转酶2C多肽(TGM2)ELISA试剂盒
AlkB同源蛋白8抗体 MHCⅢ/HLA-Ⅲ ELISA Kit 主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA试剂盒
ABI基因家族成员3结合蛋白抗体 MHCⅡ/HLA-Ⅱ ELISA Kit 主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA试剂盒
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