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XL10-Gold 电感受态细胞50ul*5

更新时间:2023-10-26

简要描述:

XL10-Gold 电感受态细胞50ul*5是采用大肠杆菌经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA 的化学转化。使用pUC19 质粒检测,转化效率可达108个转化子/μg质粒DNA,-70℃保存3个月转化效率可保持在90%以上。

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XL10-Gold 电感受态细胞50ul*5以下是的订购信息储存条件:-70℃冻存
操作方法:
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100 μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,*次使用前做预实验确定所加质粒的量),用手管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
XL10-Gold 电感受态细胞50ul*53. 加入700 μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
4. 6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天
注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
XL10-Gold 电感受态细胞50ul*52. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
3. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4. 浓度不应高于25 μg/ml,过高的浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
5. 培养基中加入的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。

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 鸡促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒 :英文名称; Chicken follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit 购买我公司ELISA试剂盒保证质量,灵敏性高、特异性强、重复性好等优点已经得到广大客户的认可,您可放心,且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。 :规格; 96T/48T 鸡促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒厂家 鸡促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒报价 

XL10-Gold 电感受态细胞50ul*5 鸡白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA试剂盒 :英文名称; Chicken Avian Leukosis Virus AG,ALV-AG ELISA Kit 购买我公司ELISA试剂盒保证质量,灵敏性高、特异性强、重复性好等优点已经得到广大客户的认可,您可放心,且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。 :规格; 96T/48T 鸡白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA试剂盒厂家 鸡白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA试剂盒报价 

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