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AH109 感受态细胞100ul*50

产品时间:2018-11-17

简要描述:

AH109 感受态细胞100ul*50菌株一种常用于质粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的产物可与pUC载体编码的b-半乳糖苷酶氨基端实现a互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1 的突变有利于克隆DNA 的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

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AH109 感受态细胞100ul*50以下是的订购信息储存条件:-70℃冻存
操作方法:
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100 μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,*次使用前做预实验确定所加质粒的量),用手管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
AH109 感受态细胞100ul*503. 加入700 μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
4. 6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天
注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
AH109 感受态细胞100ul*502. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4. 利福平浓度不应高于25 μg/ml,过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
5. 培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。

 AFP 人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白 规格: 48T/96T

 fMet 人甲酰甲硫氨酸 规格: 48T/96T

 PGD2-MOX 人甲肟前列腺素D2 规格: 48T/96T

 Methylase 人甲基化酶 规格: 48T/96T

 MTX 人喋呤 规格: 48T/96T

 PV-IgG 人脊髓灰质炎病毒IgG 规格: 48T/96T

 CSF 人集落刺激因子 规格: 48T/96T

 VLDLR 人极低密度脂蛋白受体 规格: 48T/96T

 KLK 8 人激肽释放酶8 规格: 48T/96T

 KLK 6 人激肽释放酶6 规格: 48T/96T

 KLK 11 人激肽释放酶11 规格: 48T/96T

 KLK 10 人激肽释放酶10 规格: 48T/96T

 KLK 1 人激肽释放酶1 规格: 48T/96T

 CKMB 人激动异构酶/细胞分裂素MB 规格: 48T/96T

 SDF-1β/CXCL12 人基质细胞衍生因子1β 规格: 48T/96T

 SDF-1a/CXCL12 人基质细胞衍生因子1a 规格: 48T/96T

 ST3 人基质裂解素 规格: 48T/96T

 ST2 人基质裂解素 规格: 48T/96T

 ST1 人基质裂解素 规格: 48T/96T

 MAT 人基质裂解蛋白 规格: 48T/96T

 TIMP-1 人基质金属蛋白酶组织抑制因子1 规格: 48T/96T

 TIMP-4 人基质金属蛋白酶抑制因子4 规格: 48T/96T

 TIMP-3 人基质金属蛋白酶抑制因子3 规格: 48T/96T

 TIMP-2 人基质金属蛋白酶抑制因子2 规格: 48T/96T

 TIMP-1 人基质金属蛋白酶抑制因子1 规格: 48T/96T

 MMP-9/Gelatinase B 人基质金属蛋白酶9/明胶酶B 规格: 48T/96T

 MMP-8 人基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶 规格: 48T/96T

 MMP-7 人基质金属蛋白酶7 规格: 48T/96T

 MMP-5 人基质金属蛋白酶5 规格: 48T/96T

 MMP-4 人基质金属蛋白酶4 规格: 48T/96T

 MMP-3 人基质金属蛋白酶3 规格: 48T/96T

 MMP-2 人基质金属蛋白酶2/明胶酶A 规格: 48T/96T

 MMP-13 人基质金属蛋白酶13 规格: 48T/96T

AH109 感受态细胞100ul*50 MMP11 人基质金属蛋白酶11 规格: 48T/96T

 MMP-10 人基质金属蛋白酶10 规格: 48T/96T

 MMP-1 人基质金属蛋白酶1 规格: 48T/96T

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