在生物实验（如ELISA、qPCR）中，标准品用于建立标准曲线，其浓度准确性直接影响检测结果的可靠性。稀释过程中若发生污染（如微生物滋生、交叉污染、吸附损失或化学降解），会导致标准曲线偏移、重复性差甚至实验失败。因此，规范操作至关重要。

避免污染的关键措施

一、容器选择与处理

使用低吸附材质的离心管（如低吸附聚丙烯管），避免标准品（尤其是蛋白质类）被管壁吸附导致浓度偏低。

对于易受玻璃溶出物影响的标准品（如含K⁺、Na⁺的溶液），应选用塑料容器而非玻璃瓶。

所有容器需清洁干燥，必要时进行灭菌处理（如高压灭菌或紫外线照射），防止微生物污染。

二、稀释剂（稀释液）控制

优先使用试剂盒配套的标准品稀释液，因其经过优化，可维持标准品稳定性。

若自行配制，常用PBS缓冲液、生理盐水或细胞培养基，确保pH和离子强度适宜，并经过滤除菌。

稀释液应新鲜配制或在有效期内使用，避免反复冻融造成成分变质。

三、移液器与吸头管理

使用经校准的移液器，确保加样精度；每次更换吸头，严禁“一枪到底"以防止交叉污染。

推荐使用带滤芯的吸头，尤其在处理易气溶胶污染的样本时，能有效阻隔污染物进入移液器内部。

四、操作流程规范

梯度稀释法：采用“系列稀释"方式，每步混匀后更换新吸头进行下一浓度转移，避免高浓度溶液污染低浓度管。

混匀技巧：轻柔涡旋或吹打混匀，避免剧烈震荡产生气泡或导致蛋白变性。

现用现配：标准品稀释后应尽快使用，不宜长期存放；如需保存，应分装冷冻并避免反复冻融。

五、环境与行为控制

在洁净台或生物安全柜中操作，减少空气中尘埃和微生物污染。

操作人员佩戴手套、口罩，避免皮肤脱落物或呼吸引起污染。

封板膜一次性使用，防止不同板间交叉污染。

部分标准品对光敏感（如某些底物或荧光标记物），应在避光条件下操作和储存。

建议

为zuida程度避免污染，请遵循以下步骤：

l 提前准备好所有洁净耗材和稀释液；

l 在洁净环境中进行操作；

l 使用经校准的移液设备和滤芯吸头；

l 严格按照梯度稀释流程操作，每步更换吸头；

l 稀释后尽快使用或妥善保存。