更新时间:2024-01-24
NCI-H854细胞公司正在出售的产品:TEM电镜免疫细胞化学AP酶联NBT/BCIP直接检测试剂盒(含AP一抗)冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB基础检测试剂盒(无一抗和二抗)冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB间接检测试剂盒(含HRP二抗)冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB间接检测试剂盒冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB直接检测试剂盒(含HRP一抗)
公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
1、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃,5%CO2细胞
培养箱中培养;
2、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
一、商品介绍:
产品名称 | 规格 | 货号 |
NCI-H854细胞 | 1×106 | P-X9365 |
二、细胞培养操作
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品:
RatEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit大鼠内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细胞糖原0酸化酶b(GLYCOGENPHOSPHORYLASE)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒10次
大鼠促生长激素释放激素(GRH)ELISA试剂盒 ,英文名: GRH ELISA Kit
Mouse 1,3- beta D Pouguese glucosidase (1,3- beta D glucosidase) ELISA Kit 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4) 48T/96T 进口分装
ELISAKitHIS小鼠组胺规格:48T/96T
Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMRELISAKit人协同刺激分子受体(CMR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人上皮特异性抗原(ESA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠乙酰 免疫试剂盒 mouse acetyl-CoA ELISA Kit
对虾白斑病毒(WSSV)检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforsTfR(Humansolubleansferrieceptor)ELISAKit人可溶性转受体规格:48T/96T
人体组织N-乙酰转移酶2(NAT2)活性荧光定量检测试剂盒20次
ELISAKitai-Sa-Ab人抗Sa抗体规格:48T/96T
大鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人心肌肌钙蛋白T(cTn-T)免疫试剂盒 Human cTn-T ELISA Kit
中心体相关蛋白激酶Nek2抗体
谷草转氨酶2抗体
溶质载体家族25成员18抗体
MED29蛋白抗体
细胞周期调控蛋白D1抗体
白介素15抗体
磷酸化cyclin D1抗体
NCI-H854细胞CD2F-10抗体
血管内皮生长因子受体1单克隆抗体
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,用新鲜的培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。