志贺氏菌核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

订购信息：
 产品名称：志贺氏菌核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
规格：50T
编号：BH-P97256
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
颅骨造骨细胞 (HCO) ( 5×105 ) NRK-52E，大鼠肾细胞 Rattus芴甲氧羰酰氯（Fmoc-Cl）Fmoc chloride用于HPLC衍生化,≥99.0% (HPLC)

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B5氟罗里硅土(农残级)Florisil®农残级

小脑颗粒细胞 (HCGC)( 5×105 )合成硅酸镁吸附剂(250-125um)Magnesium silicate adsorbent(Synthetic)250-125um

Ⅱ型肺泡上皮细胞Many types of cells(1ml)吡氟禾草灵标准溶液(0.101mg/ml)Fluazifop-P-butyl solution0.101mg/ml

髓母细胞瘤细胞;D341Med 大鼠内膜上皮细胞*培养基 100mL恶唑酮菌() Famoxadone solution分析,98.5%
骨骼肌卫星细胞总RNAHSkMSC NAL->99%,BRL-Tryptophan

CHRF细胞，巨核细胞白血病 肺癌细胞系(未分化),Calu-6细胞 5637, 膀胱癌细胞L-()HPLC>98%,L-Tryptophan

家猫皮肤细胞;FCA-S1L->99%,BRL-Serine

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) L-赖氨酸盐酸盐>99%,BRH-Lys-OH.HCl

CL-0353hFOB 1.19(SV40转染成骨细胞)5×106cells/瓶×2L-盐酸盐>98%,BRL-Ornithine mono
志贺氏菌核酸检测试剂盒(荧光PCR法)tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1D3 胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL3'-对羟基美国进口3'-p-Hydroxy Paclitaxel

SK-MEL-1, 皮肤色素瘤细胞 Human-d5美国进口Paclitaxel-d5

BCHE Others Human  BCHE / CHE1 细胞裂解液 (阳性对照) 7-差向紫杉酚美国进口7-epi-Taxol

小气道上皮细胞RNAHSAEpiC miRNA5 μgC美国进口Paclitaxel C

SEMA5A Others Human  SEMA5A / Semaphorin-5A / SEMAF 细胞裂解液 (阳性对照) 2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-羟基-7-差向-紫衫醇美国进口2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-hydroxy-7-epi-paclitaxel
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。