立克次体核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

订购信息：
 产品名称：立克次体核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
规格：50T
编号：BH-P96617
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
小鼠肺腺癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);LA1-GFP去甲维拉帕米盐酸盐Norverapamil, 美国进口

A10细胞，大鼠主动脉血管平滑肌细胞 CCL13张氏肝细胞正常,Chang liver细胞 CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮样干细胞)5×106cells/瓶×2霉酚酸内酯 (EP 杂质H)Mycophenolic Acid Lactone (EP Impurity H)美国进口

中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1O-去甲基霉酚酸O-Desmethyl Mycophenolic Acid美国进口

RELT Others Human  RELT / TNFRSF19L 细胞裂解液 (阳性对照) 霉酚酸-d3 β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid-d3 β-D-Glucuronide美国进口

肾动脉内皮细胞Many types of cells(1ml)霉酚酸酰基 β-D-葡萄糖苷Mycophenolic Acid Acyl-β-D-glucoside美国进口
NRP1 Others Human  NRP1 / Neuropilin-1 细胞裂解液 (阳性对照) 酸>98%,BRFenofibric acid

CM-R084大鼠骨骼肌细胞*培养基100mL酸()HPLC>98%,Fenofibric acid

TYRP1 Others Human  P1 / TYRP1 细胞裂解液 (阳性对照) ()含量测定Loxoprofen

小鼠破骨细胞*培养基 100mL丹皮酚>98.5%,BRPaeonol

MiaCaPa-2胰腺癌细胞 Human pancreatic cancer cell line MiaCaPa-2 DMEM+10% FBS丹皮酚()HPLC>98%,Paeonol
立克次体核酸检测试剂盒（荧光PCR法）稳定表达EBNA1的胚肾细胞;293E(±)-柚皮素()HPLC>90%,Naringenin

TMED4 Others Human  TMED4 / ERS25 细胞裂解液 (阳性对照) 二乙酰>95%N(2),9-Diacetylguanine

CL-0376LA795(小鼠肺腺癌细胞)5×106cells/瓶×2山姜素()HPLC≥98%，Alpinetin

Pcc4细胞，胚癌细胞 白血病细胞,SK细胞 Asp2胚胎肾细胞转化细胞;FC33埃博霉素A>98%,BREpothilone A

高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd>98%,BRMafenide Acetate
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。