星状病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

订购信息：
 产品名称：星状病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
规格：50T
编号：BH-P97248
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
胚胎心脏成纤维样细胞;HEH2赫斯特荧光燃料33258bisBenzimide H 33258 >98%,进分

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) 赫斯特荧光燃料33342bisBenzimide H 33342 tri>98%,进分

HCC-9204 肝癌Fluo-3 AM;钙荧光探针Fluo 3-AM >90%,进口

293 [HEK-293]胚肾细胞 293 human embryonic kidney cell line [HEK-293] DMEM+10% FBSIndo 1-AM;钙荧光探针Indo 1-AM>95%,进口

TNF Protein Rat 重组大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白Fluo 4-AM;钙荧光探针Fluo 4-AM>95%,进口
CL-0330COLO 320DM(结直肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2L-高盐酸盐>98%,BRL-Homoarginine 

CLK3 Others Human  CLK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) TPCK(进分)>97%,进分,Sigma T4376TPCK

外根壳细胞总RNAHHORSC NATPCK>97%,BRTPCK

CNE细胞，鼻咽癌细胞 胚肺成纤维细胞,HFL-I细胞 原代骨骼肌细胞特制基础无血清培养基Many types of cells　500/100mlL-苯甲酯盐酸盐0.98(s)-2-phenylglycine methyl ester

豹猫肺成纤维样细胞;LCL3D-乙酯盐酸盐>98.5%,BRH-D-Ala-OEt·HCl
星状病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）ILKAP Others Human  ILKAP 细胞裂解液 (阳性对照) 2,4,4'-三羟基二苯甲酮(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)2,4,4'-Trihydroxybenzophenone

P388D1 小鼠样瘤细胞2,3',4,4'-四羟基二苯甲酮(>90.0%(GC)(T))>90.0%(GC)(T)2,3',4,4'-Tetrahydroxybenzophenone

小鼠神经干细胞(EGFP标记)1,4-双(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)1,4-Bis(4-aminophenoxy)benzene

小鼠海马神经胶质细胞(EGFP标记)1,3-双(4-羟基苯氧基)苯(>97.0%(GC))>97.0%(GC)1,3-Bis(4-hydroxyphenoxy)benzene

正常前列腺上皮细胞;RWPE-1 食管平滑肌细胞*培养基 100mL2-(羟甲基)-12-冠4-(>95.0%(GC))>95.0%(GC)2-(Hydroxymethyl)-12-crown 4-Ether