更新时间:2024-12-01
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实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
产品名称 | 栀子PCR鉴定试剂盒保存 |
英文名称 | gardeniae |
货号 | BH-P99280 |
产品及特点:
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒。
具有高灵敏度、高特异性、高稳定性
可在同一个管子中高特异性的执行cDNA合成与基于探针的qPCR反应。更多优点如1.的特异性;2.多重反应(高通量);3.反应体系配置,无需冰块;4.无惧高GC含量PCR;5.预防交叉污染;6.广泛的设备兼容性。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
RKO-E6(人结肠癌转基因细胞) 5×106cells/瓶×2四环素(国产)Tetracycline质量规格:BR,国产
GBC-SD(人胆囊癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0312293ET(人胚肾细胞(SV40T和EBNA1基因修饰细胞))5×106cells/瓶×2 盘羊皮肤细胞;ASHS3乙基氢化铜蛋白,盐酸奥普托欣Ethylhydrocupreine HCl,Optochin HCl质量规格:>97%,美国进口
小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-1莫西菌素,莫西克汀Moxidectin 质量规格:>90%,BR
16. 细胞系统莫西菌素,莫西克汀(标准品)Moxidectin 质量规格:含量测定,标准品
CM-M003小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞*培养基100mLAmrine质量规格:>98%,BR
小鼠单核巨噬细胞;J774A.1(硫酸盐)敏乐啶(标准品)Mixidil Sulfate质量规格:HPLC>98%,标准品
IL6R Others Mouse 小鼠 IL6RA / CD126 人细胞裂解液 (阳性对照) MQAE(氯离子荧光探针)N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquilinium bromide质量规格:进分
人T瘤转基因细胞;Jurkat D,E特立氟胺A771726 (Teriflumide)质量规格:>99%,二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)抑制剂
BCAM Others Mouse 小鼠 BCAM 人细胞裂解液 (阳性对照) 当归酰基戈米辛H(标准品)Angeloylgomisin H质量规格:HPLC≥96%,标准品
CW-2 人结肠癌细胞美曲勃龙(R-1881)Methyltrielone质量规格:>98%,BR
猫肾细胞;CRFKO-叔丁基-L-质量规格:度98%,BRO-tert-Butyl-L-serine
ADAM15 Others Human 人 ADAM15 / MDC15 人细胞裂解液 (阳性对照) Idelalisib;CAL101质量规格:>99%,选择性p110δ抑制剂CAL-101 (GS-1101)
CL-0395NCI-H2227(人小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2O-叔丁基-L-质量规格:98%,BRO-tert-Butyl-L-threonine
METAP1D Others Human 人 MAP1D / Mine Amipeptidase 1D 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-乙酰-D-质量规格:0.98N-Acetyl-D-tryptophan
人前脂肪细胞-皮下总RNAHPA-s NAD-甲酯盐酸盐质量规格:0.99H-D-Tyr-OMe·HCl
栀子PCR鉴定试剂盒保存人EB病毒转化的B细胞;CGM1 人尿道上皮细胞*培养基 100mLD-果糖-6-1酸二钠盐质量规格:>95%,BRD-Fructose-6-phosphate di salt
人心脏微血管内皮细胞RNAHCMEC miRNA5 μg白头翁皂苷B质量规格:HPLC≥98%,标准品Pulchineside B
VEGFA Others Human 人 VEGF121b / VEGF-A 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 2