多食棘阿米巴属通用PCR检测试剂盒说明书

多食棘阿米巴属通用PCR检测试剂盒说明书组成及试剂配制:
1、 酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
多食棘阿米巴属通用PCR检测试剂盒说明书3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
多食棘阿米巴属通用PCR检测试剂盒说明书1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可保存，但应避免反复冻融（zui多冻融3次）；
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：
    1.特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
    5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。

    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

phospho-Dnmt1(Tyr399) 磷酸化DNA甲基转移酶1抗体

DHCR7 7脱氢还原酶抗体

Dbx2 大脑发育同源蛋白2抗体

DEGS1 退行性精母细胞同源物1抗体

DSCC1 DSCC1蛋白抗体

DcR2 诱捕受体2抗体

DMAP1 DNA甲基转移酶相关蛋白1抗体

DMC1 减数分裂同源蛋白DMC1抗体

DNA Ligase III DNA连接酶3抗体

phospho-DNA PKcs (Thr2638) 磷酸化DNA依赖性蛋白激酶抗体

phospho-DNA PKcs (Thr2647) 磷酸化DNA依赖性蛋白激酶抗体

DNA polymerase delta p50 DNA聚合酶δ2/DNA pol δ 2抗体

DNA Polymerase delta, catalytic subunit DNA聚合酶δ催化亚单位/DNA pol δ cat抗体

DNA polymerase eta DNA聚合酶η抗体

DNA Polymerase gamma DNA聚合酶γ/DNA pol γ抗体

DNA Polymerase iota DNA聚合酶ι/DNA pol ι抗体

DNA Polymerase Kappa/POLK DNA聚合酶κ/DNA pol κ抗体

DNA Polymerase lambda DNA聚合酶λ/DNA pol λ抗体

DNA polymerase mu DNA聚合酶μ/DNA pol μ抗体

DNAJA2 细胞周期蛋白3抗体

DNAJC9 DNAJC9蛋白抗体

Dnmt2 DNA甲基转移酶2抗体

Dnmt3L DNA甲基转移酶3L抗体

DPP10 二肽基肽酶10抗体

DPP3 二肽氨基肽酶3抗体

DREF DNA复制相关元件结合因子抗体

DRIL1 B淋巴细胞转录调节相关蛋白DRIL1抗体

DRIP130 转录共激活因子130抗体

Drosha 核糖核酸酶3/Drosha抗体

DTYMK 脱氧胸苷酸激酶DTYMK抗体

多食棘阿米巴属通用PCR检测试剂盒说明书DUSP10 双特异性蛋白磷酸酶10抗体

DUSP5 双特异性蛋白磷酸酶5抗体

phospho-Dynamin 1 (Ser774) 磷酸化酶动力蛋白1抗体

Dynamin 1 酶动力蛋白1抗体

phospho-Dynamin 1 (Ser778) 磷酸化酶动力蛋白1抗体

Dynorphin A 脑啡肽A抗体

DMWD 强直性肌营养不良相关蛋白9抗体

DYX1C1 DYX1C1蛋白抗体

DZIP3 E3泛素蛋白连接酶dzip3抗体