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脆弱拟杆菌PCR检测试剂盒说明书

更新时间:2023-11-05

简要描述:

脆弱拟杆菌PCR检测试剂盒说明书是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。

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脆弱拟杆菌PCR检测试剂盒说明书组成及试剂配制:
1、 酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
脆弱拟杆菌PCR检测试剂盒说明书3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

样本采集、存放及运输:
1、脆弱拟杆菌PCR检测试剂盒说明书样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势:
    1.特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
    2.   重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
    3.   灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
    5.   优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。

    6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

ACAA1 乙酰酰基转移酶1抗体

phospho-beta Actin (Tyr53) 磷酸化β-肌动蛋白抗体

phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser346) 磷酸化肾上腺素能受体β2/β2-AR 抗体

phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser355 + Ser356) 磷酸化肾上腺素能受体β2/β2-AR抗体

APOD 载脂蛋白D抗体

ASIC1/BNaC2/ASIC1A 酸敏感离子通道1抗体

ADAR1 (C-terminus) 双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体(C端)

AF10 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体

ADCY1 腺苷酸环化酶1抗体

APC 腺瘤样息肉抗体

AGPAT1 溶血磷脂酰基转移酶抗体

ANKS3 锚蛋白重复及SAM结构域蛋白3抗体

phospho-ALK (Tyr1586) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体

ACADVL 酰基脱氢酶很长链抗体

AMSH 信号转导衔接结合蛋白抗体

ASB3 锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体

Aurora C 有丝分裂激酶B抗体

Phospho-Ack1 (Tyr284) 磷酸化Ack1抗体

Phospho-Ack1 (Tyr326) 磷酸化Ack1抗体

Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗体

Phospho-Aurora A (Thr288) 磷酸化有丝分裂激酶A抗体

phospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗体

Aurora A 有丝分裂激酶A抗体

AIM2 干扰素诱导蛋白AIM2抗体

Aquaporine 2 水通道蛋白-2抗体

ABI2 肿瘤抑制基因ABI2/蛋白激酶结合蛋白抗体

脆弱拟杆菌PCR检测试剂盒说明书ARL11 ADP核糖基化因子样11抗体

ARMCX3 ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体

ARMCX1 ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体

ARMCX2 ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体

Apg10 自噬相关蛋白10抗体

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