更新时间:2023-11-06
乙型流感病毒PCR检测试剂盒说明书是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
乙型流感病毒PCR检测试剂盒说明书组成及试剂配制:
1、 酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
乙型流感病毒PCR检测试剂盒说明书样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
特点优势:
1.特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
乙型流感病毒PCR检测试剂盒说明书2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
蛋白单克隆抗体 英文缩写: Digoxin(2E2)
肿瘤坏死因子配体超家族成员10C 英文缩写: DcR1
干扰素诱导蛋白p58ipk抗体 英文缩写: DNAJC3
转录调节因子DACH2抗体 英文缩写: DACH2
穿膜蛋白DLK1抗体 英文缩写: DLK1
Dysferlin蛋白抗体 英文缩写: Dysferlin
防御素β2/Defensin β2抗体 英文缩写: Defensin Beta 2
死亡相关蛋白5抗体 英文缩写: DAP5
解旋酶DEAD5抗体 英文缩写: DDX19B
细胞间粘附分子非整合素蛋白3抗体 英文缩写: DC-SIGN
Caspase 激活的脱氧核糖核酸酶抗体 英文缩写: DFFB
死亡效应结构域蛋白1抗体 英文缩写: DEDD1
死亡效应结构域蛋白2抗体 英文缩写: DEDD2
DNA聚合酶β抗体 英文缩写: DNA Polymerase beta
死亡相关蛋白6/Fas死亡区相关蛋白抗体 英文缩写: DAXX
乙型流感病毒PCR检测试剂盒说明书酶动力蛋白2抗体 英文缩写: Dynamin 2
防御素β2/Defensin β2抗体 英文缩写: Defensin beta 2
多巴胺受体相互作用蛋白5抗体 英文缩写: DRIP5
性发育转录因子蛋白DMO抗体 英文缩写: Dmrta1
无胸腺症关键蛋白6样抗体(迪格奥尔格综合征) 英文缩写: DGCR6L
轴丝动力蛋白10抗体 英文缩写: DNAH10
D型天冬氨酸抗体 英文缩写: D.Aspartic acid
DYDC1蛋白抗体 英文缩写: DYDC1
二氢嘧啶抗体 英文缩写: Dihydropyrimidinase