MDA-MB-415人乳腺癌细胞

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

    a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。        

     c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

     b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。  

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

NR1D1： 细胞核受体Rev-Erbα抗体 大鼠垂体瘤细胞;GH3

RT4(人膀胱移行细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 T-24(膀胱变移细胞癌) 大鼠胎球蛋白B(FETUB)ELISA试剂盒 AmAC-1  大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1 96T

NCR2： 细胞毒性受体NK-p44抗体 黑人Butt淋巴瘤细胞;RAJI

LIF Protein Mouse 重组小鼠 LIF 蛋白 (Fc 标签) 大鼠胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒 IL-1 Alpha (Human Interleukin 1 Alpha)  人白介素1α 96T

NKG2C： NK细胞受体2C抗体 MAP2K6 Others Human 人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

RBL-2H3(大鼠嗜碱性细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 EphA3 人细胞裂解液 (阳性对照) 人白介素1β转换酶(ICE)ELISA 试剂盒 OCLN(Occluding) 咬合蛋白抗原 0.5mg

AIF1： 离子钙接头蛋白抗体 人少突胶质细胞HO

CCL11 Protein Human 重组人 CCL11 蛋白 (His 标签) 人白介素1β (IL-1β)ELISA 试剂盒 Oct-4(Octamer-4) 胚胎干细胞关键蛋白抗原 0.5mg

IRX4： Iroquois同源蛋白4抗体 PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人胎盘羊膜细胞培养基 100mL 人白介素1α(IL-1α )ELISA 试剂盒 ODC(Ornithine decarboxylase) 鸟酸脱羧酶抗原 0.5mg

MDA-MB-415人乳腺癌细胞RPS27A： RPS27A抗体 CSF3 Others Human 人 G-CSF / GCSF 人细胞裂解液 (阳性对照)

人牙周膜成纤维细胞总RNAHPLF NA 大鼠层粘蛋白α1(LAMA1)ELISA试剂盒 BMP-7(Human Bone morphogenetic protein 7)  人骨成型蛋白7 96T

RANK： 核转录因子NF-κB受体抗体 VERO细胞衍生株;SVP

人皮肤成纤维细胞;HSAS4 人胎盘绒毛膜细胞培养基 100mL 大鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒 25(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3) 人25羟基维生3 96T

ROR alpha： 维相关孤儿受体α抗体 膀胱上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)