紫苏梗LAMP鉴定试剂盒说明书

储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据地黄保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照《食品卫生微生物学检验阪崎肠杆菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。
二、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购上海泽叶生物科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
1、液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
2、固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
3、粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
4、其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议在样品制备区域加入阳性对照。

二咖啡酰菊苣酸 HPLC≥98% 20mg 小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(PV1)ELISA试剂盒 ，英文名： PV1 ELISA Kit

二羟丙E HPLC≥98% 20mg 犬血栓素B2(TXB2)ELISA检测试剂盒CanineThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 96T/48T

二氢草莓酸 HPLC≥98% 20mg 犬心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)试剂盒 Canine Cardiac oponin Ⅰ,cTn-Ⅰ ELISA kit

二氢丹参酮I HPLC≥98% 20mg 英文名称HumanHistoneDeacetylaseELISAKit人组织蛋白去乙酰化酶(HD)规格：96T/48T

二氢胆 HPLC≥98% 200mg 超声化鲑鱼精单链DNA10毫升

二氢胆 HPLC≥98% 20mg RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISA试剂盒大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二氢黄连碱 HPLC≥98% 20mg 小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员4(PM4)ELISA试剂盒 ，英文名： PM4 ELISA Kit

二氢姜黄素 HPLC≥98% 20mg 犬血栓前体蛋白(TpP)ELISA检测试剂盒Caninethrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T

二氢 HPLC≥98% 20mg 犬纤溶酶原激活物抑制剂1(SERPINE1)试剂盒 Dog plasminogen activator inhibitor 1,SERPINE1 ELISA kit

二氢辣椒素酯 HPLC≥98% 10mg 英文名称humanHistamineELISAKIT人组胺(Histamine)规格：96T/48T
Paris Saponin VII  68124-04-9  中文名：重楼皂苷VII  分子式：C51H82O21    Mouseai-thyroid-globulinaibody,TGABELISAKit 小鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Polyphyllin D  50773-41-6  中文名：重楼皂苷D  分子式：C44H70O16    HumanEotaxin1ELISA试剂盒人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Sitostenone  1058-61-3  中文名：豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O    组织PKG-I激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one  36450-02-9  中文名：6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O2    Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit人(PK)ELISA试剂盒规格：96T/48T

22-Dehydroclerosteryl acetate  28594-00-5  中文名：  分子式：C31H48O2    兔子高迁移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
紫苏梗LAMP鉴定试剂盒说明书原莪述烯醇 HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein60,hSP-60ELISAKit大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒规格：96T/48T

醉椒素 HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein60,hSP-60ELISA试剂盒大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒规格：96T/48T

，二氢甲氧醉椒素 HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein70,hSP-70ELISAKit大鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格：96T/48T

黄卡瓦胡椒素B HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein70,hSP-70ELISA试剂盒大鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格：96T/48T

,二甲氧基黄烷酮 HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISAKit大鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒规格：96T/48T

楮树黄酮醇F HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISA试剂盒大鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒规格：96T/48T

,'二异戊烯基金雀异黄素 HPLC≥95% 20mg RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit大鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA试剂盒规格：96T/48T

山豆根黄烷酮A HPLC≥95% 20mg RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISA试剂盒大鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA试剂盒规格：96T/48T

龙血素D HPLC≥95% 20mg RatHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit大鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

血竭黄烷A HPLC≥95% 20mg RatHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISA试剂盒大鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

实验流程：

1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。