Ishikawa人子宫内膜癌细胞

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

    a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。        

     c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

     b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。  

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

phospho-MLC(Ser20)： 0酸化肌球蛋白轻链抗体 MGC80-3细胞，胃癌细胞 人喉癌细胞,TU212细胞 正常大鼠肾细胞;NRK

KDR Others Mouse 小鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠细胞色素P450 3A4(CYP3A4)ELISA试剂盒 IL-1 Beta(Human Interleukin 1 Beta)  人白介素1β (IL-1B) 96T

MuRF1/Trim63： 肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶1抗体 人角膜上皮细胞cDNAHCEpiC cDNA

CAL 27人舌鳞癌细胞 Human tongue squamous cell carcinoma cell line CAL 27 DMEM+10% FBS 大鼠细胞色素P450 1A1(CYP1A1)ELISA试剂盒 T 睾酮 96T

MAFbx/Fbx32： 泛素蛋白连接酶抗体 RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 人细胞裂解液 (阳性对照)

CXCL16 Protein Canine 重组狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 标签) 人乙酰化酶(CHAc)ELISA 试剂盒 HLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原 0.5mg

HOMER2： HOMER2抗体 ENPP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 ENPP3 / CD203c 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人胰岛β细胞培养基 100mL 人酯转移蛋白(CETP)ELISA 试剂盒 HLA-E 人类白细胞抗原E 0.5mg

HDBP2： 瘤病毒调控因子1抗体 水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S5 肾透明细胞腺癌，786-0细胞 A-375 [A375](恶性黑色素瘤细胞)

REG3A Others Rat 大鼠 REG3A 人细胞裂解液 (阳性对照) (CH)ELISA试剂盒 Anti-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高迁移率族蛋白A1抗原 0.5mg

Ishikawa人子宫内膜癌细胞PSGR： 前列腺特异性G蛋白偶联受体/嗅觉受体51E2抗体 CD58 Others Cynomolgus 食蟹猴 LFA-3 / CD58 人细胞裂解液 (阳性对照)

NCI-H345(悬浮) 小细胞肺癌 大鼠低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)ELISA试剂盒 FS(Human Follistatin)  人卵泡抑素 96T

P2Y11： G蛋白偶联嘌呤受体p2y11抗体 THP1细胞，人单核细胞型淋巴瘤 人导管瘤细胞,BT-474细胞 非必需氨基酸　100XNEAA

CD83 Others Mouse 小鼠 CD83 / HB15 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)ELISA试剂盒 TAb(Human Parathyroid Hormone Related Protein)  人甲状腺素抗体 猴源细胞

NCI-N87 [N87]人胃癌细胞 大鼠低密度脂蛋白受体(LDLR)ELISA试剂盒 CA(Human catecholamine)  人儿茶酚胺 96T