HK-2人肾皮质近曲小管上皮细胞

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

    a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。        

     c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

     b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。  

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

NCI-H23(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 Pt K1 (NBL-3)(长鼻袋鼠肾细胞) 大鼠性别决定区Y框蛋白2(SOX2)ELISA试剂盒 PLAUR/uPAR (Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor)  兔型纤溶酶原激活物受体 96T

Myosin VIIa： 肌球蛋白7a/常染色体隐性耳聋蛋白2抗体 兔源细胞

IL11RA Protein Canine 重组狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白 (His 标签) 大鼠型乙酰受体(N-AChR)ELISA试剂盒 ACE I  大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶 96T

MBC1： 膀胱癌突变蛋白1抗体 ACOX1 Others Human 人 ACOX1 / aox 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

大鼠视网膜色素上皮细胞培养基 100mL 大鼠型乙酰受体(N-AChR)ELISA 试剂盒 uPA (Rabbit urokinase plasminogen activator)  兔型纤溶酶原激活物 96T

大耳山羊肺细胞;LDG-1 人富含半胱酸蛋白61(Cyr61)ELISA试剂盒 sFRP-4(Secreted frizzled-related protein 4; Frizzled protein, human endometrium) 抗子宫内膜抗原 0.5mg

HDHD1A： 卤酸脱卤酶样水解酶域内含蛋白1A抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞(彝族);HYL

LoVo(人大肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 EDNRB / Endothelin B Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 人副肿瘤性天疱疮抗体(PNP)ELISA 试剂盒 Endostatin 内皮抑素/内皮他丁抗原 0.5mg

HECTD1： E3连接酶抑制素受体抗体 纤维粘连蛋白-牛源BPF

CCL4 Protein Human 重组人 CCL4 / MIP1B 蛋白 (His 标签) 人副甲状旁腺激素相关肽(PTHrp)ELISA 试剂盒 E.coli O6 (Escherichia coli O6) E.coli O6大肠杆菌菌体蛋白 0.5mg

HK-2人肾皮质近曲小管上皮细胞95-D人高转移肺癌细胞 Human high metastatic lung cancer cell line 95-D RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA 试剂盒 Free-T3  大鼠游离状腺原酸 96T

PTPRN： 蛋白酪酸0酸酶样N前体蛋白抗体 KLK13 Others Human 人 KLK13 / Kallikrein-13 人细胞裂解液 (阳性对照)

人癌细胞;SK-BR-3 大鼠分泌型0脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒 HCV-IgG(Human Hepatitis C virus IgG)  人丙型肝炎IgG 96T

PSMD12： 26S蛋白酶调节亚型p55抗体 黄牛皮肤细胞;BTA-S2

293来源病毒包装细胞;ΦA-GP 人成纤维细胞培养基 100mL 大鼠分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)ELISA试剂盒 NN-T4  大鼠新生甲状腺素 96T