蕲蛇LAMP鉴定试剂盒说明书

储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据地黄保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照《食品卫生微生物学检验阪崎肠杆菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。
二、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购上海泽叶生物科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
1、液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
2、固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
3、粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
4、其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议在样品制备区域加入阳性对照。

Acetyl CoA Carboxylase  乙酰羧化酶抗体  0.2ml
Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79)  磷酸化乙酰羧化酶抗体  0.1ml
ACD  肾上腺皮质发育异常蛋白抗体  0.2ml
ACHE/Acetylcholinesterase  乙酰酶抗体  0.1ml
Acinus  Acinus抗体  0.2ml
phospho-Acinus(Ser1180)  磷酸化腺泡Acinus蛋白抗体  0.1ml
Ack1  醋酸激酶1抗体  0.2ml
Phospho-Ack1(Tyr859/860)  磷酸化Ack1抗体  0.1ml
Phospho-Ack1(Tyr284)  磷酸化Ack1抗体  0.1ml
Phospho-Ack1(Tyr326)  磷酸化Ack1抗体  0.1ml
ACSL1  长链脂肪酸连接酶1/2抗体  0.2ml
ACTH (1-39)  促肾上腺皮质激素(1-39)抗体  0.1ml
Phospho-MKP1 (Ser318)  磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗体  0.1ml
ACTH (18-39)  促肾上腺皮质激素ACTH(18-39)抗体  0.1ml
ACTH (7-23)  促肾上腺皮质激素ACTH (7-23)抗体  0.1ml
Actin α/alpha-SMA  肌动蛋白α(α-SMA)抗体  0.1ml
Sarcomeric Alpha Actinin/ACTN2  α横纹肌辅肌动蛋白/α-SCA抗体  0.1ml
alpha Actinin 4  α-辅肌动蛋白4抗体  0.2ml
F-Actin  纤维状肌动蛋白抗体  0.1ml
ACOT8  酰基硫酯酶8  0.2ml
Agpat2  溶血磷脂酸酰基转移酶β抗体  0.2ml
AGPAT4  溶血磷脂酸酰基转移酶D抗体  0.2ml

LEPR(Human Leptin Receptor) ELISA Kit  人瘦素受体  96T
AT2R(Human Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit  人血管紧张素Ⅱ受体2  96T
ANG II R-1(Human angiotension II receptor 1) ELISA Kit  人血管紧张素Ⅱ受体1  96T
ANG-4(Human Angiopoietin 4) ELISA Kit  人血管生成素4  96T
sMHC-1(Human soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit  人可溶性肌球蛋白重链1  96T
HSF-1(Human Heat Shock Factor 1) ELISA Kit  人热休克因子1  96T
VPI(Human vasopeptidase inhibitors) ELISA Kit  人血管活性肽酶抑制剂  96T
CMLC-1(Human Cardiac myosin-light chains 1) ELISA Kit  人心肌肌凝蛋白轻链1  96T
IMA(Human Ischemia Modified Albumin) ELISA Kit  人缺血修饰白蛋白  96T
8-epi-PGF2 Alpha(Human 8-epi-prostaglandin F2alpha0 ELISA Kit  人8-异构前列腺素F2α  96T
sVE-Cadherin (Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex) ELISA Kit  人血管内皮钙粘着蛋白复合体  96T
Alpha-SMA(Human Alpha-Smooth muscle actin) ELISA Kit  人α平滑肌肌动蛋白  96T
Alpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit  人α横纹肌肌动蛋白  96T
SMM(Human smooth muscle Myosin) ELISA Kit  人平滑肌肌球蛋白  96T
cTnT(Human cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit  人心肌特异性肌钙蛋白T  96T
MHC(Human myosin heavy chain) ELISA Kit  人肌球蛋白重链  96T
HSP-27(Human heat shock protein 27) ELISA Kit  人热休克蛋白27  96T
ANG(Human angiostatin) ELISA Kit  人血管抑素/血管稳定蛋白  96T
h-FABP(Human heart fatty acid binding protein) ELISA Kit  人心型脂肪酸结合蛋白  96T
b-FABP(Human brain fatty acid binding protein) ELISA Kit  人脑型脂肪酸结合蛋白  96T
BK(Human Bradykinin) ELISA Kit  人血管舒缓激肽  96T
MLC(Human Myosin light Chain) ELISA Kit  人肌球蛋白轻链  96T
ACTN-3(Human Alpha-Actinin 3) ELISA Kit  人α-辅肌动蛋白3  96T
hs-CRP(Human high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit  人超敏C反应蛋白  96T
Tn- I (Human Troponin I ) ELISA Kit  人肌钙蛋白Ⅰ  96T
SAA(Human Serum amyloid A) ELISA Kit  人血清淀粉样蛋白A  96T
Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60) ELISA Kit  人热休克蛋白60  96T
HSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit  人热休克蛋白糖蛋白96  96T
CT-1(Human cardiotrophln 1) ELISA Kit  人心肌营养素1  96T
CP/CER(Human Ceruloplasmin) ELISA Kit  人铜蓝蛋白  96T
HSP-90(Human Heat Shock Protein 90) ELISA Kit  人热休克蛋白90  96T
HSP-70(Human Heat Shock Protein 70) ELISA Kit  人热休克蛋白70  96T
HSP-40(Human Heat Shock Protein 40) ELISA Kit  人热休克蛋白40  96T
HSP-20(Human Heat Shock Protein 20) ELISA Kit  人热休克蛋白20  96T
MYS(Human Myosin) ELISA Kit  人肌球蛋白  96T
GS(Human Gelsolin) ELISA Kit  人凝溶胶蛋白  96T
蕲蛇LAMP鉴定试剂盒说明书CRP(Human C-Reactive Protein) ELISA Kit  人C反应蛋白  96T
ALD(Human aldosterone) ELISA Kit  人醛固酮  96T
MYO/MB(Human Myoglobin) ELISA Kit  人肌红蛋白  96T
实验流程：
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。