HL-1小鼠心肌细胞

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

1、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 培养

液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃，5%CO2细胞

培养箱中培养；

一、商品介绍：

2、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终

止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序

降温盒可直接放入-80℃。

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的产品：

MLK3： 丝酸/苏酸蛋白激酶MLK3抗体 人脉络丛成纤维细胞RNAHCPF miRNA5 μg

F81猫肾细胞 F81 feline kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠信号传导转录激活因子3(STAT3)ELISA试剂盒 BDNF(Mouse Brain derived neurotrophic facor)  小鼠脑源性神经营养因子 96T

Phospho-MLK3(Thr277 + Ser281)： 0酸化丝酸/苏酸蛋白激酶MLK3抗体 FZD1 Others Mouse 小鼠 FZD1 人细胞裂解液 (阳性对照)

人骨髓间充质干细胞(hMSCs) 大鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒 sCKR(Human soluble cytokine receptor)  人可溶性细胞因子受体 96T

MSK1： 有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体 小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-1

SEMA5A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 人细胞裂解液 (阳性对照) 人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA 试剂盒 ER- Alpha(phospho-Ser167)peptide 人0酸化雌激素受体α多肽抗原 0.5mg

Phospho-HSL (Ser863)： 0酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体 CL-0042BxPC-3(人原位胰腺腺癌细胞)5×106cells/瓶×2

C918细胞，人眼脉络黑色素瘤细胞 粪肠球菌(高耐) 正常小鼠Sertoli细胞;TM4 人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA 试剂盒 ER- Alpha(phospho-Tyr537)peptide 0酸化雌激素受体α抗原 0.5mg

phospho-Histone H1.4(Thr18)： 0酸化组蛋白H1.4抗体 SERPINE1 Others Human 人 PAI-1 / SerpinE1 人细胞裂解液 (阳性对照)

犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild 人分泌型0脂酶A2(sPLA2)ELISA 试剂盒 ER- Alpha /ER alpha peptide 雌激素受体α抗原 0.5mg

HL-1小鼠心肌细胞MOLT-4 人急性淋巴母细胞白血病细胞 大鼠肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)ELISA试剂盒 LH  大鼠促黄体激素 96T

PGRPS： 肽聚糖识别蛋白1抗体 CCC-ESF-1细胞，人胚胎皮肤成纤维细胞 人癌细胞,MDA-MB-415细胞 口腔角质细胞培养基OKM

LRIG1 Others Mouse 小鼠 LRIG1 / LIG-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒 AMA  大鼠抗心肌抗体 CM-H045人肝动脉平滑肌细胞培养基100mL

NCI-H1975人肺腺癌细胞 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1975 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA 试剂盒 TR(Human Testoterone recepter)  人受体 96T

PARP3： 多腺苷二0酸多聚酶3抗体 KLK1 Others Human 人 KLK-1 / Kallikrein-1 人细胞裂解液 (阳性对照)

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。