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导致细胞生长缓慢的常见原因
  • 发布日期:2021-09-24      浏览次数:2218
    •   导致细胞生长缓慢的常见原因:
       
        一、培养基可能缺乏细胞生长所需的某种因子,出现这种情况一般都是小伙伴们购买细胞后没有按照ATCC或国内细胞库的方法配制培养基,就使用实验室师兄师姐用的培养基去养细胞。处理方法一般来说就是按照方法配制培养基,或是直接购买所养细胞专用的培养基。
       
        二、细菌、支原体、真菌等污染:虽然现在培养基里面一般都会添加双抗(和),但是如果无菌操作观念不强,依然很有可能导致污染。处理方法:如果有冻存的细胞,就可以把污染的细胞丢弃处理,当然,丢弃不是随意扔进垃圾桶就可以了,要按照实验室生物安全规范操作进行。然后重新复苏培养,建议把培养箱进行全面的消毒处理。若是没有冻存,而这种细胞又是很珍贵的,常见的处理方法就是药物处理:细菌污染加5-10倍的抗生素;真菌污染就加抗真菌药物;支原体污染就加抗支原体药物,具体药物可以咨询相关公司的技术支持,他们会比较专业。
       
        三、很多细胞的生长存在密度依赖性,如果传代后,细胞的密度太小,也是会影响到细胞生长的。这个时候没什么特别好的处理办法,只得勤换液。如果细胞培养瓶使用的是T75倒可以消化、离心、重悬,然后接种到T25的培养瓶中培养。
       
        四、冻存细胞DMSO(二甲基亚砜)加的量不正确,没有逐步梯度降温。下次复苏后的细胞总是长不好。处理方法:按照的冻存方式配制冻存液。有的细胞适合10%的DMSO,有的细胞适合5%;严格遵守逐步梯度降温原则,细胞复苏时快速解冻。
       
        五、换液间隔时间太长,有的小伙伴养细胞真的很“佛系”,想起了就去换个液,信奉一句话“你已经是成熟的细胞了,应该学着自己觅食,成长”。这种情况下细胞培养瓶中就会积累很多细胞代谢废物,影响细胞活性。建议:勤换液
       
        六、细胞“消化”时间过长,对细胞造成损伤;另外中一般会添加EDTA,螯合钙离子,影响细胞贴壁。处理方法:控制好细胞“消化”时间,尽量去除干净和其中的EDTA.
       
        七、PH:细胞需要在一定的PH值下生长,这个道理小伙伴们都懂。但是很多时候PH都是我们忽略的,也是小编今天要强调的一点。我们使用的培养基可能会随着使用时间的加长而缓慢变碱哦!(当然,也有可能会变酸,但常见的是变碱),一般来说,过碱的培养基会影响到细胞生长。处理方法:简单的就是换新鲜培养基呗!当然,如果有时间和有条件也可以调一调培养基的PH值。
       
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