更新时间:2024-01-22
MEF小鼠胚胎成纤维细胞公司正在出售的产品:GLUT8: 葡萄糖转运蛋白8抗体 AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人细胞裂解液 (阳性对照)CL-0326Caki-2(人肾透明细胞癌细胞)5×106cells/瓶×2 人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA 试剂盒 IgG/Gold 胶体金标记的小鼠抗羊IgG 2mlGlycophorin C: 糖蛋白C抗体 M
公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
1、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃,5%CO2细胞
培养箱中培养;
产品名称 | 规格 | 货号 |
MEF小鼠胚胎成纤维细胞 | 1×106 | P-X1078 |
一、商品介绍:
产品名称 | MEF小鼠胚胎成纤维细胞 |
种属 | C57BL/6小鼠 |
细胞别称 | MEF;小鼠胚胎成纤维细胞 |
年龄性别 | 9天 |
生长特性 | 贴壁生长 |
组织来源 | 胚胎 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
背景简介 | 取孕9天的615小鼠胚胎,去除脑、心脏等培养建立。MEF细胞可用作饲养层细胞,支持胚胎干细胞ES的生长并维持ES未分化的状态。当作为饲养层细胞时,MEF需经丝裂C处理停止生长。 |
生物安全等级 | |
细胞规格 | 1×106 |
支原体检测 | 无 |
基因表达情况 | |
保藏机构 | |
培养基 | DMEM+10% FBS+PS |
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
倍增时间 |
2、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
二、细胞培养操作
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品:
LEP Protein Human 重组人 Leptin 蛋白 大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 ER 大鼠雌激素受体 96T
SLC12A3: 氯离子转运蛋白抗体 PRDX2 Others Human 人 Peroxiredoxin 2 / PRDX2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠结肠平滑肌细胞培养基 100mL 大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA 试剂盒 IGFBP-4(Human insulin-like growth factors binding protein 4) 人结合蛋白4 96T
NSE: 神经元特异性烯醇化酶/γ 烯醇化酶抗体 RM-1细胞,前列腺癌细胞 人胚胎肠粘膜细胞,CCC-HIE-2细胞 恒河猴肾细胞;RM-2
CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠酸性铁蛋白(AIF)ELISA试剂盒 IGFBP-3(Human insulin-like growth factors binding protein 3) 人结合蛋白3 96T
CCL17 Protein Mouse 重组小鼠 CCL17 / TARC 蛋白 人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA 试剂盒 PAX8(Paired box gene 8) 配对盒基因8抗原 0.5mg
phospho-IGF1R (Tyr1161): 0酸化1受体抗体 MAPK12 Others Human 人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人子宫成纤维细胞培养基 100mL 人癌基因蛋白质p190/bcr-abl ELISA 试剂盒 PAX9(Paired box gene 9) 配对盒基因9抗原 0.5mg
IDE: 胰岛素降解酶抗体 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B 人卵巢癌细胞,SK-OV-3[SKOV-3]细胞 BT549(管癌细胞)
SEMA4D Others Rat 大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) 人癌标志物-CA153ELISA 试剂盒 P-cadherin(placental) P-钙粘附分子抗原 0.5mg
MEF小鼠胚胎成纤维细胞人脉络丛成纤维细胞总RNAHCPF NA 大鼠补体成分4(C4)ELISA试剂盒 AMPK(Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase) 人0酸化腺苷酸活化蛋白激酶 96T
RNF41: 环指蛋白41抗体 非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-
转化细胞 人卵巢成纤维细胞培养基 100mL 大鼠补体成分3(C3)ELISA试剂盒 LDH(Human Lactate Dehydrogenase) 人乳酸脱氢酶 96T
RAD21: 核基质蛋白21抗体 原代肝实质细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml
RA, 大鼠星形胶质细胞 大鼠补体C5a(C5a)ELISA试剂盒 ADAM9(Human A Disintegrin And Metalloprotease 9) 人解整合素样金属蛋白酶9 96T
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,用新鲜的培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。