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MEF小鼠胚胎成纤维细胞

更新时间:2024-01-22

简要描述:

MEF小鼠胚胎成纤维细胞公司正在出售的产品:GLUT8: 葡萄糖转运蛋白8抗体 AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0326Caki-2(人肾透明细胞癌细胞)5×106cells/瓶×2 人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA 试剂盒 IgG/Gold 胶体金标记的小鼠抗羊IgG 2ml
Glycophorin C: 糖蛋白C抗体 M

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公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!



1、细胞传代:

1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;

2)添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 培养

液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;

3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃,5%CO2细胞

培养箱中培养;

产品名称

规格

货号

MEF小鼠胚胎成纤维细胞

1×106

P-X1078

一、商品介绍:

产品名称

MEF小鼠胚胎成纤维细胞

种属

C57BL/6小鼠

细胞别称

MEF;小鼠胚胎成纤维细胞

年龄性别

9

生长特性

贴壁生长

组织来源

胚胎

细胞形态

成纤维细胞样

背景简介

取孕9天的615小鼠胚胎,去除脑、心脏等培养建立。MEF细胞可用作饲养层细胞,支持胚胎干细胞ES的生长并维持ES未分化的状态。当作为饲养层细胞时,MEF需经丝裂C处理停止生长。

生物安全等级


细胞规格

1×106

支原体检测

基因表达情况


保藏机构


培养基

DMEM+10% FBS+PS

培养条件

气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37

冻存条件

无血清冻存液,液氮储存

倍增时间


 

2、细胞冻存:

1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;

2)添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入培养液终

止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;

3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;

4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序

降温盒可直接放入-80℃。

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。


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公司正在出售的产品:

LEP Protein Human 重组人 Leptin 蛋白 大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 ER  大鼠雌激素受体 96T

SLC12A3: 氯离子转运蛋白抗体 PRDX2 Others Human Peroxiredoxin 2 / PRDX2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠结肠平滑肌细胞培养基 100mL 大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA 试剂盒 IGFBP-4(Human insulin-like growth factors binding protein 4)  人结合蛋白4 96T

NSE: 神经元特异性烯醇化酶/γ 烯醇化酶抗体 RM-1细胞,前列腺癌细胞 人胚胎肠粘膜细胞,CCC-HIE-2细胞 恒河猴肾细胞;RM-2

CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠酸性铁蛋白(AIF)ELISA试剂盒 IGFBP-3(Human insulin-like growth factors binding protein 3)  人结合蛋白3 96T

CCL17 Protein Mouse 重组小鼠 CCL17 / TARC 蛋白 人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA 试剂盒 PAX8(Paired box gene 8) 配对盒基因8抗原 0.5mg

phospho-IGF1R (Tyr1161) 0酸化1受体抗体 MAPK12 Others Human ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人子宫成纤维细胞培养基 100mL 人癌基因蛋白质p190/bcr-abl ELISA 试剂盒 PAX9(Paired box gene 9) 配对盒基因9抗原 0.5mg

IDE: 胰岛素降解酶抗体 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B 人卵巢癌细胞,SK-OV-3[SKOV-3]细胞 BT549(管癌细胞)

SEMA4D Others Rat 大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) 人癌标志物-CA153ELISA 试剂盒 P-cadherin(placental) P-钙粘附分子抗原 0.5mg

MEF小鼠胚胎成纤维细胞人脉络丛成纤维细胞总RNAHCPF NA 大鼠补体成分4(C4)ELISA试剂盒 AMPK(Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase)  0酸化腺苷酸活化蛋白激酶 96T

RNF41: 环指蛋白41抗体 非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-

转化细胞 人卵巢成纤维细胞培养基 100mL 大鼠补体成分3(C3)ELISA试剂盒 LDH(Human Lactate Dehydrogenase)  人乳酸脱氢酶 96T

RAD21: 核基质蛋白21抗体 原代肝实质细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml

RA, 大鼠星形胶质细胞 大鼠补体C5a(C5a)ELISA试剂盒 ADAM9(Human A Disintegrin And Metalloprotease 9)  人解整合素样金属蛋白酶9 96T


三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,用新鲜的培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。

9. 注意:  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。





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