bEnd.3小鼠脑微血管内皮细胞株

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

1、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 培养

液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃，5%CO2细胞

培养箱中培养；

2、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终

止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序

降温盒可直接放入-80℃。

一、商品介绍：

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的产品：

大鼠子宫成纤维细胞培养基 100mL 大鼠早老素2(PS2)ELISA试剂盒 OVA/RBITC 罗丹明标记鸡卵白蛋白 0.3ml

LRIG1： LRIG1抗体 SP2/0, 小鼠骨髓瘤细胞 小细胞肺癌细胞,NEI-H209细胞 ECV304(人脐静脉内皮细胞株)

APOA1 Others Mouse 小鼠 ApoA1 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠早老素1(PSEN1)ELISA试剂盒 AACT/RBITC 罗丹明标记胰 0.3ml

LRIG3： LRIG3抗体 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C2

Lec1仓鼠卵巢细胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培养基(GIBCO)+10%FBS 大鼠早老素1(PS-1)ELISA试剂盒 Insulin Protein/FITC 荧光素标记人胰岛素蛋白 0.5ml

HEBP1： 血红素结合蛋白1抗体 PPT1 Others Human 人 PPT1 / Palmitoyl-protein thioesterase 1 人细胞裂解液 (阳性对照)

U-87 MG人脑星形胶质母细胞瘤 U-87 MG of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS 人抗染色体抗体(ai-chromosome Ab)ELISA 试剂盒 Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原 0.5mg

Hemoglobin alpha： 血红蛋白α抗体 犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild Mo-MuLv感染的3T3细胞，Mo-MuLv/3T3细胞 LA795细胞，小鼠肺腺癌细胞系

C10ORF54 Others Human 人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 人细胞裂解液 (阳性对照) 人抗浦肯野细胞抗体/抗Yo抗体(PCA-1/Yo)ELISA 试剂盒 APG4B/AUTL1 APG4B细胞自噬相关抗原 0.5mg

Haptoglobulin beta： 结合球蛋白β抗体 CSC, 小鼠心肌细胞

bEnd.3小鼠脑微血管内皮细胞株ENPP1： 核苷酸内焦0酸酶/0酸二酯酶1抗体 PTK6 Others Human 人 PTK6 / Brk 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

HCT-8 人回盲肠癌细胞 大鼠基质细胞衍生因子1(SDF1)ELISA试剂盒 PM-Scl/PM-1(Human polymyositis-sclerosis antibody)  人抗多发性肌炎硬皮病抗体 NCL-H460细胞，非小细胞肺癌 人肺动脉内皮细胞,HPAEC细胞 肝动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

KLRB1F Others Mouse 小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠基质溶素(MAT)ELISA试剂盒 Human anti-PL7-antibody  人PL7抗体 CL-0232TF-1(人血液白血病细胞)5×106cells/瓶×2

786-O [786-0]人肾透明细胞腺癌细胞 786-O [786-0] human renal clear cell carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA试剂盒 IgG  大鼠免疫球蛋白G 96T

Pet1： ETS结构域转录因子FEV抗体 TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人细胞裂解液 (阳性对照)

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。