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K599 感受态细胞100ul*50

更新时间:2023-10-26

简要描述:

K599 感受态细胞100ul*50菌株一种常用于质粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的产物可与pUC载体编码的b-半乳糖苷酶氨基端实现a互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1 的突变有利于克隆DNA 的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

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K599 感受态细胞100ul*50以下是的订购信息储存条件:-70℃冻存
操作方法:
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100 μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,*次使用前做预实验确定所加质粒的量),用手管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3. 加入700 μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
K599 感受态细胞100ul*504. 6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天
注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
K599 感受态细胞100ul*503. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4. 浓度不应高于25 μg/ml,过高的浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
5. 培养基中加入的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。

 Amylin 大鼠胰淀素 规格: 48T/96T

 ICA 大鼠胰岛细胞抗体 规格: 48T/96T

 IAA 大鼠胰岛素自身抗体 规格: 48T/96T

 PI 大鼠胰岛素原 规格: 48T/96T

 IGFBP-4 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4 规格: 48T/96T

 IGFBP-3 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3 规格: 48T/96T

 IGFBP-2 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2 规格: 48T/96T

 IGFBP-1 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1 规格: 48T/96T

 IGF-2 大鼠胰岛素样生长因子2 规格: 48T/96T

 IGF-1 大鼠胰岛素样生长因子1 规格: 48T/96T

 ISR-β 大鼠胰岛素受体β 规格: 48T/96T

 INS 大鼠胰岛素 规格: 48T/96T

 TAP 大鼠原激活肽 规格: 48T/96T

 trypsin 大鼠 规格: 48T/96T

 NOS 大鼠一氧化氮合成酶 规格: 48T/96T

 FA 大鼠 规格: 48T/96T

 OLAb 大鼠氧化低密度脂蛋白抗体 规格: 48T/96T

 OxLDL 大鼠氧化低密度脂蛋白 规格: 48T/96T

 NADPH 大鼠腺嘌呤二核苷酸磷酸 规格: 48T/96T

 N-AChR 大鼠烟碱型乙酰受体 规格: 48T/96T

 PF-4/CXCL4 大鼠血小板因子4 规格: 48T/96T

 PF-3 大鼠血小板因子3 规格: 48T/96T

 PDGFsR-α 大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α 规格: 48T/96T

 PDGF-BB 大鼠血小板衍生生长因子BB 规格: 48T/96T

 PDGF-AB 大鼠血小板衍生生长因子AB 规格: 48T/96T

 PDGF 大鼠血小板衍生生长因子 规格: 48T/96T

 TPO 大鼠血小板生成素 规格: 48T/96T

 GP-ⅡbⅢa 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa 规格: 48T/96T

 PAF 大鼠血小板活化因子 规格: 48T/96T

 TSP-1 大鼠血小板反应蛋白/敏感蛋白1 规格: 48T/96T

 FDP 大鼠血纤蛋白原降解产物 规格: 48T/96T

 Fbg 大鼠血纤蛋白原 规格: 48T/96T

 TXB2 大鼠血栓素B2 规格: 48T/96T

 TpP 大鼠血栓前体蛋白 规格: 48T/96T

 TM 大鼠血栓调节蛋白 规格: 48T/96T

 K599 感受态细胞100ul*50CH50 大鼠血清总补体 规格: 48T/96T

 NO 大鼠血清一氧化氮 规格: 48T/96T

48T/96T

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