更新时间:2024-11-23
Ar 1193 感受态细胞100ul*50是采用大肠杆菌经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA 的化学转化。使用pUC19 质粒检测,转化效率可达108个转化子/μg质粒DNA,-70℃保存3个月转化效率可保持在90%以上。
Ar 1193 感受态细胞100ul*50以下是的订购信息储存条件:-70℃冻存
操作方法:
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100 μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,*次使用前做预实验确定所加质粒的量),用手管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3. 加入700 μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
Ar 1193 感受态细胞100ul*504. 6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天
注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
Ar 1193 感受态细胞100ul*503. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4. 浓度不应高于25 μg/ml,过高的浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
5. 培养基中加入的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
IgE 马免疫球蛋白E 规格: 48T/96T
β-EP 马β内啡肽 规格: 48T/96T
Aβ1-40 马β淀粉样蛋白1-40 规格: 48T/96T
TGFβ2 骆驼转化生长因子β2 规格: 48T/96T
Lp-PL-A2 骆驼脂蛋白磷脂酶A2 规格: 48T/96T
ET-1 骆驼内皮素1 规格: 48T/96T
β-EP 骆驼β内啡肽 规格: 48T/96T
CC16 裸鼠克拉拉细胞蛋白 规格: 48T/96T
AFP 裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白 规格: 48T/96T
COX-2 裸鼠环加氧酶2 规格: 48T/96T
PP 裸鼠蛋白磷酸酶 规格: 48T/96T
MrNV 罗氏沼虾诺达病毒 规格: 48T/96T
MHC 鹿主要组织相容性复合体 规格: 48T/96T
IGFBP-3 鹿胰岛素样生长因子结合蛋白3 规格: 48T/96T
SAA 鹿血清淀粉样蛋白A 规格: 48T/96T
eNOS 鹿内皮型一氧化氮合成酶 规格: 48T/96T
EMP 鹿红细胞膜蛋白 规格: 48T/96T
VTG 鲤鱼卵黄蛋白原 规格: 48T/96T
VTG 鲤鱼卵黄蛋白原 规格: 48T/96T
UEA 荆豆凝集素 规格: 48T/96T
LT 家蚕卵黄蛋白 规格: 48T/96T
TGF-β1 鸡转化生长因子β1 规格: 48T/96T
MHC/B 鸡主要组织相容性复合体 规格: 48T/96T
TRAIL-R3 鸡肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3 规格: 48T/96T
TNF-α 鸡肿瘤坏死因子α 规格: 48T/96T
LPS 鸡脂多糖/内毒素 规格: 48T/96T
ACAC 鸡乙酰乙酸检测 规格: 48T/96T
IGF-1 鸡胰岛素样生长因子1 规格: 48T/96T
NADPH 鸡腺嘌呤二核苷酸磷酸 规格: 48T/96T
PF-4/CXCL4 鸡血小板因子4 规格: 48T/96T
NO 鸡血清一氧化氮 规格: 48T/96T
VEGF 鸡血管内皮细胞生长因子 规格: 48T/96T
HA 鸡透明质酸 规格: 48T/96T
CA 鸡碳酸酐酶 规格: 48T/96T
GH 鸡生长因子 规格: 48T/96T
ADM 鸡肾上腺髓质素 规格: 48T/96T
Ar 1193 感受态细胞100ul*50 GFAP 鸡神经胶质纤维酸性蛋白 规格: 48T/96T
HSP-70 鸡热休克蛋白70 规格: 48T/96T
HSP-70 鸡热休克蛋白70 规格: 48T/96T
Hsp-60 鸡热休克蛋白60 规格: 48T/96T