PNOS基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

订购信息：
 产品名称：PNOS基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
规格：48T  0.2PCR管
编号：BH-P97068
分类：PCR-荧光探针法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
CM-H010小气道上皮细胞*培养基100mL()Procaine HPLC>99%,

WM35, 色素瘤细胞伏立诺他杂质Vorinostat impurity>98%

肝癌细胞;Hep G2 [HepG2] 大鼠肺成纤维细胞*培养基 100mL当药醇苷()SwertianolinHPLC≥98%,

原代神经元细胞培养特制添加剂Many types of cells　5/2.5/1ml皂素(进分)saponin进分，≥10 %

MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 细胞裂解液 (阳性对照) 苦豆碱AloperineHPLC>95%,BR
支气管平滑肌细胞cDNAHBSMC cDNABOC-L-天冬酰胺≥98.5%,BRBoc-Asn-OH

小型猪肾细胞;MPK 畸胎癌细胞，P19细胞 W256细胞，Walker氏癌肉瘤256瘤株Boc-L->98.5%,BRBoc-Gln-OH

Sars结构蛋白表达株;293 001ABoc-L- N-丁二酯BRBoc-Ala-OSu

HA Others H5N3 甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) BOC-D->98.5%,BRBoc-D-Ala-OH

CL-0240V79(仓鼠肺细胞)5×106cells/瓶×2BOC-L-天冬氨酸>98.5%,BRBoc-Asp-OH
PNOS基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）SW1990细胞，胰腺癌细胞 胸膜瘤细胞,SMC-1细胞 杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7E74-乙酰氧基它莫西芬美国进口4-Acetoxy Tamoxifen

HUVEC(HUV-EC-C) (脐静脉血管内皮细胞) 5×106cells/瓶×2N-去甲基-4-羟基它莫西芬-d5 (1:1 E/Z 混合物)美国进口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (1:1 E/Z Mixture)

Promocell C-22022 Endothelial Cell GrowthMedium MV2, 内皮细胞生长培养基MV2(即用型) 500ml(Z)-4-羟基-N-去甲基它莫西芬 (同分)美国进口(Z)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen (mixture of isomers)

生发基质细胞裂解物HHGMCLN-去甲基-4-羟基它莫西芬 (大约1:1 E/Z 混合物)美国进口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen (approx. 1:1 E/Z Mixture)

IL17RB Others Human  IL17RB / IL-17 Receptor B 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (1R,4R)-N-去甲基美国进口(1R,4R)-N-Desmethyl Sertraline
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。