GUS基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

订购信息：
 产品名称：GUS基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
规格：48T  0.1PCR管
编号：BH-P97065
分类：PCR-荧光探针法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
CM-H029脐带单核细胞*培养基100mL糊精;白糊精DextrinBR

DU145细胞，前列腺癌细胞 涎腺腺样囊性癌细胞,Acc-3细胞 整合SV40基因的上皮细胞;HBL-100 [HBL100]盐酸苄达明Benzidamine HCl>98%,BR

615小鼠癌瘤株;Ca761葡聚糖凝胶G-50;交联葡聚糖G-50(中颗粒)Sephadex G-50分类范围3×100000

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Brevig Mission/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) 葡聚糖凝胶G-50;交联葡聚糖G-50(粗颗粒)Sephadex G-50分类范围3×100000

皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1L-(+)-扁桃酸;S-扁桃酸(S)-(+)-Mandelic acid>99.0%,BR
CL-0403NCI-H524(非小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2偶氮磺III(>90.0%(HPLC))>90.0%(HPLC)Sulfonazo III

ACBD6 Others Human  ACBD6 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2-(4-磺基苯偶氮）-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸三钠盐水合物(>95.0%(HPLC))>95.0%(HPLC)3 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate

脐静脉内皮细胞总RNAHUVEC NA2,2'-二羟基偶氮苯(>98.0%(T))>98.0%(T)2,2'-Dihydroxyazobenzene

Jecket细胞，瘤细胞 肺腺癌细胞,SPC-A1细胞 EC109，食管癌细胞S-乙酰半盐酸>98%,BRS-Acetamidomethyl-L-cysteine

猫星形脑胶质细胞;PG-4(S+L-)O-叔丁基-L-甲酯盐酸盐0.98O-tert-Butyl-L-threonine methyl ester
GUS基因核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 细胞裂解液 (阳性对照) N-苯甲酰-N-苯基羟胺;钽试剂;BPHA>98%;ARN-Phenylbenzohydroxamic Acid;Tantalon

侵袭性脉络膜色素瘤细胞;C9186-氯核苷>98%,BR6-Chloroguanosine

HuH-7细胞，肝癌细胞 小鼠样瘤细胞,P388D1细胞 小型猪肾细胞;MPK-5'-三1酸三钠盐>95%,BRITP•Na3

MDA-MB-435S(导管癌细胞) 5×106cells/瓶×2鸟苷-5'-三1酸二钠盐>95%,BRGTP.Na2

Promocell C-22121 Endothelial Cell GrowthMedium MV 2 KIT, 内皮细胞生长培养基MV2套装 500ml4,4'-二正辛氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N))>95.0%(N)4,4'-Di-n-octyloxyazoxybenzene
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。