SP6 RNA聚合酶

各位从事科研工作的小伙伴们，实验中所用到的试剂、配制试剂的液体，有时可能是实验成败的关键，因此大家在使用时一定要留意各种试剂的级别。原则上讲，纯度越高越好，但是价格也就越高，所以要根据各自的需要选择合适的品质，避免不必要的浪费！

SP6 RNA聚合酶
英文名称：SP6 RNA Polymerase
其他名称：SP6核糖核酸聚合酶
级别：BR
分子量：单体约98kDa
来源：大肠杆菌细胞，含有编码相应RNA聚合酶的克隆基因
浓度：20u/ul（≥100U/ul，HC）
活力定义：是指在37℃、60分钟内将1nmol AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段（DE-81)光吸收形式）所需的酶量
酶活性分析混合物：40mM Tris-HCL(PH8.0), 10mM DTT, 6mM MgCL2, 2mM 亚精胺，0.5mM 各种NTP, 0.6MBq/ML(3H).-ATP和20ug/ml含有相应启动子序列的质粒DNA
保存缓冲：每种聚合酶保存于50mM Tris-HCL(PH8.0), 5mM DTT, 0.1mg/ml BSA,150mM NaC1, 0.5mM ELUGENT去污剂和50%(V/V) 甘油
5×转录缓冲液：200mM Tris-HCL(PH9.0,25℃), 30mM MgCL2, 50mM DTT, 50mM NaC1和10mM 亚精胺
抑制剂：金属螯合剂，当NaC1或KC1浓度高于150mM(SP6和T7 RNA聚合酶）时，酶活性降低超过50%，硫酸铵可使酶活性降低超过50%
失活：加入EDTA或者70℃加热10分钟
质量控制：相关测试表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
功能测试：体外转录反应
SP6 RNA聚合酶特点：合成掺入特殊核苷酸，如氨基-、-、荧光素-、地辛-标记的核苷酸
性状(以下信息仅供参考)：液体,SP6核糖核酸聚合酶是一种依赖DNA的聚合酶，对SP6启动子序列表现高度专一性。用该酶合成RNA，仅能以SP6 DNA或克隆在SP6 启动下游的DNA作为合成模板。该酶能以32P，35S及3H标记的核苷三磷酸为底物
用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)合成标记和未标记的RNA，用于杂交、体外RNA翻译；作为RNA、siRNA、RNase酶切保护分析的底物以及基因组DNA测序的模板；研究RNA的二级结构和RNA-蛋白质相互作用、RNA剪接；标记的RNA探针合成，用于印迹实验、原位杂交、microarray杂交
保存：-20℃

产品规格
SP6 RNA聚合酶GR：优级纯。主成份含量很高、纯度很高，适用于精确分析和研究工作，有的可作为基准物质.
AR：分析纯。主成份含量很高、纯度较高，干扰杂质很低，适用于工业分析及化学实验。
CP：化学纯。主成份含量高、纯度较高，存在干扰杂质，适用于化学实验和合成制备。
LR：实验纯。主成份含量高、纯度较差，杂质含量不做选择，只适用于一般化学实验和合成制备。
BR：生化试剂。用于配制生物化学检验试液，和生化合成。质量指标注重生物活性杂质。可替代指示剂和有机合成。
BS：生物染色剂。适用于配制生物标本染色液。质量指标注重生物活性杂质。可替代指示剂和有机合成。
Ind：显色剂。
HPLC：适用于高压液相色谱的试剂。
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试剂开瓶的问题
随着全自动生化分析仪的普及，“开瓶稳定性”也随之受到了大家的重视，但是就目前有的试剂方法学来讲，还达不到人们所要求的试剂开瓶后在仪器内放很长时间不需要定标，比如ALP、TP、GSP等PH为碱性的试剂，开瓶后试剂会吸收空气中的二氧化碳，使试剂本身的PH值下降，如果长时间开瓶不定标或校准，会使检测结果发生偏离，在国外有的项目有明文规定，必须72小时之标，比如BUN。但是在国内的某些实验室为了方便，很长时间都不作校准，导致测定结果的不准确。解决办法：了解试剂的特性，及时对部份项目进行校准，对于每天标本量不多的医院，可按1～2天的用量取用试剂放入仪器。

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