T4 DNA连接酶9015-85-4

各位从事科研工作的小伙伴们，实验中所用到的试剂、配制试剂的液体，有时可能是实验成败的关键，因此大家在使用时一定要留意各种试剂的级别。原则上讲，纯度越高越好，但是价格也就越高，所以要根据各自的需要选择合适的品质，避免不必要的浪费！

T4 DNA连接酶9015-85-4
英文名称：T4 DNA Ligase 
：9015-85-4
分子量：55.3kDa，单体
级别：BR
来源：含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
活性定义：是指在ATP-PPi交换反应中，37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量（weiss单位，1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位：20ul反应体系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量） 
抑制剂：当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时，可强烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活：65℃加热10分钟或70℃加热5分钟
注意：T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率，为避免此现象，电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下：样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存；转化时，连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%；电转化之前，先用方抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase，然后经乙醇沉淀纯化抽提产物
T4 DNA连接酶9015-85-4质量控制：测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测：粘性末端或平末端DNA的连接能力
性状(以下信息仅供参考)：液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'磷酸基团和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口，连接DNA的粘性和平末端，但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP
用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)粘性末端或平末端双链DNA的连接；双链寡核苷酸接头与双链DNA连接；双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复；连接酶介导的RNA检测；位点特异性突变；扩增片段长度多态性
保存： -20°C

产品规格
GR：优级纯。主成份含量很高、纯度很高，适用于精确分析和研究工作，有的可作为基准物质.
AR：分析纯。主成份含量很高、纯度较高，干扰杂质很低，适用于工业分析及化学实验。
CP：化学纯。主成份含量高、纯度较高，存在干扰杂质，适用于化学实验和合成制备。
LR：实验纯。主成份含量高、纯度较差，杂质含量不做选择，只适用于一般化学实验和合成制备。
BR：生化试剂。用于配制生物化学检验试液，和生化合成。质量指标注重生物活性杂质。可替代指示剂和有机合成。
BS：生物染色剂。适用于配制生物标本染色液。质量指标注重生物活性杂质。可替代指示剂和有机合成。
T4 DNA连接酶9015-85-4Ind：显色剂。
HPLC：适用于高压液相色谱的试剂。
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试剂开瓶的问题
随着全自动生化分析仪的普及，“开瓶稳定性”也随之受到了大家的重视，但是就目前有的试剂方法学来讲，还达不到人们所要求的试剂开瓶后在仪器内放很长时间不需要定标，比如ALP、TP、GSP等PH为碱性的试剂，开瓶后试剂会吸收空气中的二氧化碳，使试剂本身的PH值下降，如果长时间开瓶不定标或校准，会使检测结果发生偏离，在国外有的项目有明文规定，必须72小时之标，比如BUN。但是在国内的某些实验室为了方便，很长时间都不作校准，导致测定结果的不准确。解决办法：了解试剂的特性，及时对部份项目进行校准，对于每天标本量不多的医院，可按1～2天的用量取用试剂放入仪器。

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