更新时间:2024-12-05
MCF-10A人乳腺上皮细胞公司正在出售的产品:肝动脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) 豚鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒 IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的小鼠抗羊IgG 0.1mlFRAT1: 原癌基因FRAT1抗体 RA, 大鼠星形胶质细胞 RattusHPASMC-c 人肺动脉平滑肌细胞(
公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
产品名称 | 规格 | 货号 |
MCF-10A人乳腺上皮细胞 | 1×106 | P-X833 |
1、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃,5%CO2细胞
培养箱中培养;
2、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
二、细胞培养操作
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,用新鲜的培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
公司正在出售的产品:
Midnolin: 中脑核仁蛋白抗体 IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人细胞裂解液 (阳性对照)
NSC,大鼠神经干细胞 大鼠胸腺激活调节趋化因子(TARC)ELISA试剂盒 Mouse angiotension II ,ANG- II 小鼠血管紧张素Ⅱ 96T
MYH7B: 肌球蛋白重链7抗体 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1
NCI-H226(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 VERO C1008 (E6)(非洲绿猴肾细胞) 大鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒 ACE II 大鼠血管紧张素Ⅱ转化酶 96T
MYOM1: 肌间蛋白1抗体 兔间变表皮鳞癌瘤株;VX2
HBQ1: 血红蛋白theta亚型1抗体 CL-0066COLO 205(人结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2
Y79细胞,人视网膜母细胞瘤 球毛壳霉 小鼠肺腺癌细胞系;LA795 人钙调0酸酶(CaN)ELISA 试剂盒 EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 类表皮生长因子域7抗原 0.5mg
HBS1L: hbs1样蛋白抗体 MMP2 Others Human 人 MMP-2 / CLG4A 人细胞裂解液 (阳性对照)
盘羊皮肤细胞;ASHS2 人钙调结合蛋白(CALD)ELISA 试剂盒 Egr-1(Early growth response 1) 早期反应基因-1/应急反应生长基因1抗原 0.5mg
HCAP G: 缩素复合物亚型蛋白3抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞(拉祜族);KM9406
MCF-10A人乳腺上皮细胞PCDHGB5: 原钙粘蛋白γB5抗体 Hs 683细胞,人脑视神经胶质瘤细胞 人癌细胞,MDA-MB-468细胞 动物上皮细胞培养基EpiCM-a
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠辅肌动蛋白α2(ACTN2)ELISA试剂盒 T3 大鼠状腺原酸 96T
Proteasome 20S alpha 5: 蛋白酶体PSMα5抗体 CM-H069人膀胱平滑肌细胞培养基100mL
NCI-H1395人肺腺癌细胞 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1395 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠封闭蛋白5(CLDN5)ELISA试剂盒 HEV-IgG(Human hepatitis E virus IgG) 人戊型肝炎病毒IgG 96T
PNPLA6: 含patatin样0脂酶6抗体 LXN Others Human 人 Latexin / LXN / TCI 人细胞裂解液 (阳性对照)