NPC/HK-1人鼻咽癌细胞

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

1、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 培养

液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃，5%CO2细胞

培养箱中培养；

2、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终

止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序

降温盒可直接放入-80℃。

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

MFAP3L： 微丝相关蛋白3样抗体 PTPN2 Others Mouse 小鼠 PTPN2 / TC-PTP (aa 2-314) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠肺大静脉内皮细胞培养基 100mL 大鼠细胞核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒 GP210(Mouse Anti-glucoprotein 210) 小鼠抗核膜糖蛋白210抗体 T-47D细胞，管癌细胞 人食管癌细胞,EC871214细胞 大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106

MANF Others Mouse 小鼠 MANF / ARMET 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠细胞胱硫醚γ裂解酶(CSE)ELISA试剂盒 D2R  大鼠多巴胺D2受体 96T

Monoacylglycerol Lipase： 单酰甘油脂肪酶抗体 人肺成纤维细胞cDNAHPF cDNA

LLC1[LL/2]小鼠Lewis肺癌细胞 LLC1[LL/2] mice with Lewis lung cancer cells 1640+10% FBS 大鼠细胞分裂周期基因(CDC)ELISA试剂盒 A Beta1-42  大鼠β淀粉样蛋白1-42 96T

NCI-H1650(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 人释放激素(GH)ELISA 试剂盒 IFNGR1/CD119 peptide 干扰素-gamma受体1抗原 0.5mg

Phospho-Histone H3 (Thr11)： 0酸化组蛋白H3抗体 少突胶质细胞培养基OM

CXCL9 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白 人促胃液素受体(GsaR)ELISA 试剂盒 IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2) 结合蛋白-2(多肽) 0.5mg

Phospho-Histone H3 (Thr3)： 0酸化组蛋白H3抗体 RIOK1 Others Human 人 RIOK1 / RIO kinase 1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人胰腺星状细胞培养基 100mL 人促睡眠肽(DSIP)ELISA 试剂盒 IGFBP-3 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3)C-term 结合蛋白-3抗原 0.5mg

NPC/HK-1人鼻咽癌细胞小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记) 大鼠蛋白激酶Cη(PKCη)ELISA试剂盒 PROG(Human Progesterone)  人孕激素/孕酮 96T

PDK2： 酸脱氢酶激酶亚型2抗体 CD63 Others Rat 大鼠 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人细胞裂解液 (阳性对照)

NCI-H520 肺鳞癌 大鼠蛋白激酶Cζ(PKCζ)ELISA试剂盒 uE3(Human ultra Estriol)  人超敏游离雌三醇 96T

RHOBTB1： Rho相关结构域BTB蛋白质1抗体 BA/F3细胞，小鼠原B细胞 人浸润性导管癌旁皮肤细胞,CCD-1095Sk细胞 NeuroFectagen? 神经细胞转染试剂盒

F9 Others Human 人 F9 / FIX / Factor IX 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠蛋白激酶Cε(PKCε)ELISA试剂盒 NA(Human Noradrenaline)  人去甲 96T