查帕雷病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

订购信息：
 产品名称：查帕雷病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
规格：50T
编号：BH-P96485
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

整合SV40基因的上皮细胞;HBL-100 [HBL100]铌标准溶液(1000μg/ml)Niobium standard1000μg/ml

DNASE1 Others Human  DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 细胞裂解液 (阳性对照) 镍标准溶液(100μg/mL，基体:1%HNO3)Nickel Standard100μg/mL，基体:1%HNO3

CL-0384MDA-MB-468-06(癌细胞)5×106cells/瓶×2钾标准溶液(500mg/L,溶剂：水)Potassium standard500mg/L,溶剂：水

Mv1Lu细胞，貂肺上皮细胞 红白细胞白血病细胞,HEL细胞 皮肤成纤维细胞;HSAS4钾标准溶液(1000µg/mL,基体:1%HCl) Potassium Solution1000µg/mL,基体:1%HCl

鲤鱼尾鳍细胞;YZ16镨标准溶液(1000μg/ml)Praseodymium standard1000μg/ml
LAYN Others Human  Layilin 细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸钙(>99%,BR)>99%,BRCalcium sulfate, anhydrous

CM-H084脐静脉平滑肌细胞*培养基100mL二环己基碳二亚胺(>99%,BR)>99%,BRDCC, Dicyclohexylcarbodiimide

SERPINI1 Others Mouse 小鼠 SerpinI1 / Neuroserpin 细胞裂解液 (阳性对照) 丁二酸二甲酯(>99%,BR)>99%,BRDimethyl succinate

小鼠角膜上皮细胞*培养基 100mL二甲基甲酮钠盐(>97%,BR)>97%,BRDimethylglyoxime  salt

L6565小鼠白血病克隆细胞系 L6565 murine leukemia cell line RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS直接蓝71(≥50%,BR)≥50%,BRDirect blue 71
查帕雷病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）软骨细胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)N-苯甲酰-2'-脱氧胞苷>98%,BRbz-dC

MAP3K8 Others Human  TPL2 / MAP3K8 / MEKK8 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N6-苯甲酰-2'-脱氧腺苷>98%,BRbz-dA

KM小鼠子瘤株;U145'-O-三苯甲基尿苷>97%,BRTrt-rU

NIH/3T3细胞，胚胎成纤维细胞 高转移肝癌细胞,LM3细胞 CL-0104HEp-2(喉表皮样癌细胞)5×106cells/瓶×2Trt-dU>98%,BRTrt-dU

叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21N2-洛沙坦-洛沙坦(洛沙坦杂质)美国进口N2-Losartanyl-losartan (Losartan Impurity)