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人检测试剂盒储存及有效期方法
  • 发布日期:2021-01-14      浏览次数:166
    • 人检测试剂盒实验原理:

      用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗C3抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的C3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

      人检测试剂盒储存及有效期:

      未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液,终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。
      使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。

      人检测试剂盒试剂配制:

      1、 标准品

      (1) 从试剂盒中取出一支标准品,于6000-10000rpm 离心30 秒。用1ml 样本稀释液溶解,并
      用吸头对准冻存管底部反复吸打5 次以助溶解,充分混匀得到标准品S7,放置备用。

      (2) 取7 个1.5 ml 离心管(S0-S6)依次排列,各加入250μl 样本稀释液。吸取250μl 标准品
      S7 到*个离心管中(S6),轻轻吹打混匀。从S6 中吸取250μl 到第二个EP 管中(S5),
      轻轻吹打混匀。以此类推进行标准品的倍比稀释。S0 为样本稀释液。

      2、 洗液工作液

      浓洗涤液按1:25倍用去离子水进行稀释。例如用量筒量取240ml去离子水,倒入烧杯或其
      他洁净容器中,再量取10ml浓洗涤液,均匀加入,搅拌混匀,在临用前配妥。浓洗涤液低温保
      存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

      3、 生物素标记抗体工作液
      生物素标记抗体液按1:100倍用生物素标记抗体稀释液进行稀释。如10μl生物素标记抗体加
      990μl生物素标记抗体稀释液,轻轻混匀,在临用前10分钟内配妥。

      4、 辣根过氧化物酶标记亲和素工作液
      辣根过氧化物酶标记亲和素按1:100倍用辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液进行稀释。如
      10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液,轻轻混匀,在临用
      前10分钟内配妥。

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