Li-7人肝癌细胞

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

    a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。        

     c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

     b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。  

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

Mafa： v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A抗体 小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02

RAG(小鼠肾腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 H08910(卵巢癌细胞) 大鼠头蛋白(NOG)ELISA试剂盒 vaspin ELASA Kit 大鼠内脏脂肪特异性丝酸抑制剂 96T

MMP-10： 基质金属-10抗体 人胃癌细胞;MGC-803

CF Protein Mouse 重组小鼠 CF / Ciliary Neuroophic Factor 蛋白 (His 标签) 大鼠铜蓝蛋白(CP)ELISA试剂盒 NGF- Beta(Human Nerve growth factor- Beta)  人的神经生长因子-β 96T

Mtp53(N235K N239Y)： 突变型P53抗体 HK3 Others Human 人 Hexokinase-3 / HK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

ITGA11： 整合素α11抗体 人软骨细胞HC-a

CCL22 Protein Human 重组人 CCL22 / MDC 蛋白 (His 标签) 人保护素(CD59)ELISA试剂盒 CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta) CD122/白介素2受体β链抗原 0.5mg

IGFL2： 胰岛素生长因子样家族成员2抗体 DPYS Others Human 人 DPYS / Dihydropyrimidinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人结肠粘膜上皮细胞培养基 100mL 人胞浆型0脂酶A2(cPLA2)ELISA 试剂盒 MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2) 巨噬细胞炎症蛋白2抗原 0.5mg

IDI2： 异戊烯基焦0酸异构酶2抗体 罗猴胎肾细胞;MA104 脑胶质瘤细胞，C6细胞 NCI-H446 [H446](小细胞肺癌细胞)

Li-7人肝癌细胞Phospho-P105 RB (Ser788)： 0酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体 TNFRSF14 Others Human 人 TNFRSF14 / HVEA / HVEM 人细胞裂解液 (阳性对照)

人少突胶质前体细胞RNAHOPC miRNA5 μg 大鼠雌激素受体(ER)ELISA 试剂盒 PLP(Human proteolipid protein)  人蛋白脂质蛋白抗体 非洲绿猴肾细胞;VERO C1008 (E6)

人胚肺细胞系;KuMA 人肝内胆管上皮细胞培养基 100mL 大鼠雌激素(E)ELISA试剂盒 VMA(Human vanillylmandelic acid)  人垂草扁桃酸 96T

phospho-RPS6KB1(Ser427)： 0酸化核糖体S6蛋白激酶抗体 骨骼肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

MN-h, 小鼠海马神经元 大鼠雌激素(E)ELISA 试剂盒 GKRP(Human glucokinase regulatory protein)  人葡萄糖激酶调节蛋白 96T