KYSE-410人食道鳞状细胞癌

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

    a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。        

     c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

     b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。  

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

Phospho-MEF2A (Thr312)： 0酸化肌细胞增强因子2抗体 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0223SW480(人结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠唾液酸酶2(SIAL2)ELISA试剂盒 sCD40L(Human Soluble Cluster of differentiation 40 ligand)  人可溶性CD40配体 96T

Phospho-MEF2A (Ser408)： 0酸化肌细胞增强因子2抗体 tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1D3

QG-56(人肺扁平上皮癌细胞) 5×106cells/瓶×2 L-02(正常肝细胞) 大鼠唾液α1(AMY1)ELISA试剂盒 a-Glu  大鼠α葡萄糖苷酶 96T

phospho-MEK1 (Thr286)： 0酸化原活化蛋白激酶激酶1抗体 小鼠畸胎瘤细胞;P19

小鼠胚胎成纤维细胞;3T6-Swiss albino 人型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA 试剂盒 lamin A 核纤层蛋白A抗原 0.5mg

phospho-ITGB4(Tyr1530)： 0酸化整合素β4抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1022

OVCAR-3(人卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 人转酶/谷转酶(ALT/GPT)ELISA 试剂盒 LOX-1/OLR1 凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体 0.5mg

IGFBP1： 结合蛋白1抗体 人羊膜上皮细胞HAmEpiC

CCL21 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白 人基转移酶(ALT)ELISA试剂盒 LPLUNC1 人鼻咽癌癌基因多肽抗原 0.5mg

KYSE-410人食道鳞状细胞癌CL-0434SC-1(小鼠胚胎细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠促肾上腺皮质激素受体(ACTHR)ELISA试剂盒 Hyl(Human hydroxylysine)  人羟赖酸 96T

RNF126： 环指蛋白126抗体 IDS Others Human 人 Iduronate 2-Sulfatase / IDS 人细胞裂解液 (阳性对照)

人结肠平滑肌细胞RNAHCSMC miRNA5 μg 大鼠促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)ELISA试剂盒 GAP(Human GTPase activating protein)  人GTP酶活化蛋白 96T

RBC(G2H4)： 小鼠抗人红细胞单克隆抗体 恒河猴肾细胞;LLC-MK2

人胚肺细胞VA13细胞;WI-38 VA13亚系2RA 人直结肠平滑肌细胞培养基 100mL 大鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒 Apo-H(Human Apolipoprotein H)  人载脂蛋白H 96T